[发明专利]小卷蛾斯氏线虫的制备方法

权利要求书

1.一种小卷蛾斯氏线虫成品的制备方法，将小卷蛾斯氏线虫制成微胶囊。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，将线虫悬浮液和I液混合，将所述混合液滴入II液，静置后，从II液中滤出微胶囊，其中所述的I液包括：10%甘油、0.075%福尔马林、2%海藻糖、余量为蒸馏水；所述的II液包括：10%甘油、0.075%福尔马林、0.5%CaCl₂、余量为蒸馏水，所述的线虫悬浮液是将线虫加入水中配成。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，将线虫悬浮液和I液混合，将线虫的浓度调至1×10⁴IJs/ml-3×10⁴IJs/ml（优选1.5-2×10⁴IJs/ml），将所述线虫悬浮液和I液的混合液以100-130滴/min（优选110-120滴/min）的速度滴入II液，静置（优选20-60分钟，优选30-40分钟）后，用筛网将成型的微胶囊从II液中滤出。

4.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，其中所述小卷蛾斯氏线虫是由如下繁殖方法获得的：将线虫共生菌接入培养液中培养，将所述培养的线虫共生菌菌液接入装在不锈钢培养盒中的固态培养基中培养，再接入线虫悬浮液，培养线虫，收获线虫。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述不锈钢培养盒为长方体，优选长35cm，宽25cm，高20cm。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，其中所述小卷蛾斯氏线虫是由如下繁殖方法获得的：将线虫共生菌菌液以0.1ml/g的量接入装在不锈钢培养盒中的线虫固态培养基中，在25±1℃培养3d-5d后，接入线虫悬浮液，黑暗静置培养（优选25℃），定期取样检测线虫发育进程，培养3周后收获线虫。

7.根据权利要求4-6任一项所述的制备方法，其特征在于，所述线虫共生菌菌液由如下方法制备：将线虫共生菌（优选单个菌落），接入培养液，培养，优选在振荡下培养（如160rpm），培养温度优选25-28℃，培养时间优选24-48h。

8.根据权利要求4-6任一项所述的制备方法，其特征在于，所述线虫共生菌为活化的线虫共生菌，优选采用如下的方法活化共生菌：将共生菌菌种在培养基上活化，优选在25℃下培养1-2天。

9.根据权利要求4-6任一项所述的制备方法，其特征在于，所述固态培养基包括：黄豆粉，面粉，蛋白陈，酵母膏，海绵，水。

10.根据权利要求4-6任一项所述的制备方法，其特征在于，将收获的线虫连同固态培养物置于筛网中一起浸泡于装有清水的较大容器中，静置分离（优选0.5-1小时）后，线虫沉降到容器底部，将筛网连同培养物移走，再加入清水反复清洗（优选2-3次），收获清洁的线虫。