[发明专利]基于甲烷氧化菌素介导纳米金合成检测牛奶中三聚氰胺的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测牛奶中三聚氰胺的方法。

背景技术

三聚氰胺是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，是基本有机化工的中间产品，广泛运用于木材、塑料、涂料和医药等行业。近年来，三聚氰胺常被人为掺杂进食品或饲料中，以提升乳制食品或饲料检测中的蛋白质含量指标。三聚氰胺进入人体后可引起结石，损伤相应的器官。掺杂三聚氰胺对整个乳品行业产生了严重冲击。从大量的样本中采用简单有效的方法迅速检出掺杂三聚氰胺的乳品样本是非常必要的。目前采用的纳米金测定三聚氰胺方法，通常是利用三聚氰胺可导致纳米金颗粒发生聚集的特性。这些方法需要复杂的纳米金制备、纯化、修饰和保护步骤，三聚氰胺含量由纳米金溶液染色由酒红色变为紫红色或蓝色的程度判定，颜色梯度变化不明显。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有的采用的纳米金测定三聚氰胺方法需要复杂的纳米金制备、修饰和纯化的技术问题，提供了一种基于甲烷氧化菌素介导纳米金合成检测牛奶中三聚氰胺的方法。

基于甲烷氧化菌素介导纳米金合成检测牛奶中三聚氰胺的方法按照以下步骤进行：

一、牛奶的预处理：向相同体积的对照样和待检测的牛奶中分别加入三氯乙酸，20min后以10000r/min的转速离心10min，取出上清液，然后向上清液中加入NaOH至pH值为7，得到经过预处理的对照样和经过预处理的待检测牛奶；

步骤一中三氯乙酸的加入量为待检测的牛奶体积的1/5；步骤一中的对照样为不含三聚氰胺的牛奶；

二、向经过预处理的对照样和经过预处理的待检测牛奶中分别加入浓度为0.1-1mmol/L的甲烷氧化菌素水溶液，反应10min，然后再分别加入浓度为1×10^-2mol/L的氯金酸溶液，得到对照样混合物和待检测牛奶混合物，然后将对照样混合物和待检测牛奶混合物在室温下放置，对照样混合物颜色变为酒红色的同时待检测牛奶混合物没有变为酒红色，即证明所检测的牛奶中含有三聚氰胺；

甲烷氧化菌素水溶液与经过预处理的对照样的体积比为1～4∶1，甲烷氧化菌素水溶液与经过预处理的待检测牛奶的体积比为1～4∶1，氯金酸溶液与经过预处理的对照样的体积比为1∶1，氯金酸溶液与经过预处理的待检测牛奶的体积比为1∶1。

基于甲烷氧化菌素介导纳米金合成检测牛奶中三聚氰胺的方法按照以下步骤进行：

一、牛奶的预处理：向相同体积的对照样和待检测的牛奶中分别加入三氯乙酸，20min后以10000r/min的转速离心10min，取出上清液，然后向上清液中加入NaOH至pH值为7，得到经过预处理的对照样和经过预处理的待检测牛奶；

步骤一中三氯乙酸的加入量为待检测的牛奶体积的1/5；步骤一中的对照样为不含三聚氰胺的牛奶；

二、向经过预处理的对照样和经过预处理的待检测牛奶中分别加入浓度为0.1-1mmol/L的甲烷氧化菌素水溶液，反应10min，然后再分别加入浓度为1×10^-2mol/L的氯金酸溶液和浓度为5×10^-4mol/L的还原剂溶液，得到对照样混合物和待检测牛奶混合物，然后将对照样混合物和待检测牛奶混合物在室温下放置，对照样混合物颜色变为酒红色的同时待检测牛奶混合物没有变为酒红色，即证明所检测的牛奶中含有三聚氰胺；

其中所述的还原剂为对苯二酚、邻苯二酚或间苯二酚；甲烷氧化菌素水溶液与经过预处理的对照样的体积比为1～4∶1，甲烷氧化菌素水溶液与经过预处理的待检测牛奶的体积比为1～4∶1，氯金酸溶液与经过预处理的对照样的体积比为1∶1，氯金酸溶液与经过预处理的待检测牛奶的体积比为1∶1，还原剂溶液与经过预处理的待检测牛奶的体积比为5∶1，还原剂溶液与经过预处理的对照样的体积比为5∶1。

基于甲烷氧化菌素介导纳米金合成检测牛奶中三聚氰胺的方法按照以下步骤进行：

一、牛奶的预处理：向相同体积的对照样和待检测的牛奶中分别加入三氯乙酸，20min后以10000r/min的转速离心10min，取出上清液，然后向上清液中加入NaOH至pH值为7，得到经过预处理的对照样和经过预处理的待检测牛奶；

步骤一中三氯乙酸的加入量为待检测的牛奶体积的1/5；步骤一中的对照样为不含三聚氰胺的牛奶；