[发明专利]检测可溶性白细胞分化抗原40配体的试剂盒及多肽配体有效
申请号: | 201210483295.3 | 申请日: | 2012-11-23 |
公开(公告)号: | CN102964428A | 公开(公告)日: | 2013-03-13 |
发明(设计)人: | 段旭;焦守恕;李全 | 申请(专利权)人: | 同昕生物技术(北京)有限公司 |
主分类号: | C07K7/08 | 分类号: | C07K7/08;G01N33/68;G01N33/577 |
代理公司: | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 | 代理人: | 张涛 |
地址: | 102206 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 可溶性 白细胞 分化 抗原 40 试剂盒 多肽 | ||
1.一种多肽配体,其氨基酸序列如序列表中序列1所示。
2.一种检测可溶性白细胞分化抗原40配体的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包含权利要求1所述的多肽配体。
3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括辣根过氧化物酶标记的sCD40L单克隆抗体。
4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括已知浓度的重组全长CD40L抗原稀释液作为标准品。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括鲁米诺作为化学发光体系的底物,对碘苯酚作为发光增强剂。
6.一种检测可溶性白细胞分化抗原40配体的试剂盒的制备方法,包括以下步骤:
将权利要求1所述的多肽配体加入到醋酸盐缓冲液或磷酸盐缓冲液或碳酸盐缓冲液中混匀后,加入化学发光板内,4℃温浴16-22小时,弃去孔内液体后加入含有牛血清白蛋白或胎牛血清的磷酸盐缓冲液,37℃下静置2小时后,弃去孔内液体,干燥发光板,得到包被多肽配体的板条。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于:所述方法还包括以下步骤:
将sCD40L单克隆抗体用辣根过氧化物酶标记。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于:所述方法还包括以下步骤:
将重组全长CD40L抗原用蛋白稳定剂稀释成6个梯度浓度,分别为0ng/ml、1.0ng/ml、2.5ng/ml、5.0ng/ml、10.0ng/ml和20.0ng/ml。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于:所述方法还包括以下步骤:
制备化学发光底物液A液和B液:
用超纯水中配制0.1mol/L pH8.2-8.7的Tris-HCl缓冲液,加入终浓度为3mmol/L的鲁米诺、0.3mmol/L的Tween20和碘苯酚混合溶液,作为A液;
用超纯水配制的0.1mol/L pH4.4-4.8的柠檬酸缓冲液,加入终浓度为30%的H2O2溶液,作为B液。
10.权利要求1所述的多肽配体在制备检测可溶性白细胞分化抗原40配体的试剂盒中的应用。
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