[发明专利]一种表皮细胞抑裂素及其制备方法和应用

权利要求书

1. 一种表皮细胞抑裂素,其特征是从动物皮中分离纯化，分子量为30000-50000。

2.权利要求1所述一种表皮细胞抑裂素的制备方法,其特征是由以下步骤构成:

   (1)、以新鲜洗净的去油脂猪皮作为原料，通过绞肉机将猪皮制成肉皮糜;

   (.2)、以猪皮重量三倍的水作为提取液，加入肉皮糜中，通过胶体磨研磨成匀浆，在10℃以下搅拌2-3小时、过滤，滤渣再加入二倍体积水再搅拌2小时，合并二次滤液,4℃静置过夜去除上层油脂;

   (3)、去油脂滤液通过截止分子量10000的超滤膜过滤，浓缩至起始体积的3%;

   (4)、将分子量大于10000的超滤保留液经30--80%乙醇沉淀，再溶解;

(5)、将上清液通过SP—Sepharose F.F 阳离子交换层析柱，皮抑素交换在层析柱上，改变PH增加离子强度，皮抑素被洗脱。

3.根据.权利要求2所述一种表皮细胞抑裂素的制备方法,其特征是使用胶体磨研磨猪皮，使艰难匀浆的猪皮得到充分破碎。

4.权利要求1所述一种表皮细胞抑裂素的活性测定方法，其特征是用Hacat人胞培养方法测定皮抑素活性，在表皮细胞培养液中加入皮抑素，抑制表皮细胞的生长，以MTT法检测皮抑素的抑制百分率，取皮抑素从微克水平，以倍比稀释至纳克水平甚至匹克水平，将每孔中蛋白质浓度对抑制率作图得出上下平台，取上下平台的中值为活性点。

5.将抑制1%规定为一个微活性单位mu，每毫克蛋白质的活性单位为比活性（u/mg蛋白质)

权利要求1所述一种表皮细胞抑裂素在制备治疗银屑病药物中的应用。

6.   权利要求1所述一种表皮细胞抑裂素在制备治疗皮肤癌药物中的应用。