[发明专利]一种采用流式细胞术检测发酵过程中细胞活性的方法无效
| 申请号： | 201210487755.X | 申请日： | 2012-11-27 |
| 公开（公告）号： | CN103352068A | 公开（公告）日： | 2013-10-16 |
| 发明（设计）人： | 刘立明;俞晓霞;杨松鑫;陈坚 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/02 | 分类号： | C12Q1/02;C12R1/88 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 214122 江苏省无锡市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 采用 细胞 检测 发酵 过程 活性 方法 | ||
【权利要求书】：
1.利用Rh123/PI双染所培养的微生物细胞(酵母或者霉菌)，流式细胞术检测摇瓶正常发酵时和高盐胁迫下的细胞活性，得到FCM图谱，调好合适的“十字门”，象限分析得到可靠的死细胞、活细胞和凋亡细胞的比例。
2.根据权利要求1所述的方法，以多重维生素营养缺陷型的光滑球拟酵母(Torulopsisglabrata)CCTCC M202019为生产菌株，在500ml摇瓶进行发酵培养，采用流式细胞术检测分析，可简便、可靠地得到死细胞、活细胞和凋亡细胞的比例。
摇瓶发酵培养基(g/L)：
葡萄糖100，尿素7，CH3COONa 3，KH2PO43，MgSO4·7H2O 0.8，微量元素液10mL，维生素液10mL，pH 5.5。自来水定容。高盐胁迫时，发酵培养基中添加70g/LNaCl。
微量元素液：MnCl2·4H2O 0.2g，FeSO4·7H2O 2g，CaCl2·2H2O 2g，CuSO4·5H2O 0.05g，ZnCl20.5g，溶解后定容至1L。
维生素液：盐酸硫胺素1.5mg，D-生物素0.004g，盐酸吡哆醇0.04g，烟酸0.8g，6mol/LHCl溶解后定容至1L。
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