[发明专利]重型血友病A致病基因突变检测试剂盒有效
| 申请号： | 201210494686.5 | 申请日： | 2012-11-28 |
| 公开（公告）号： | CN102943114A | 公开（公告）日： | 2013-02-27 |
| 发明（设计）人： | 刘晶晶;王小薇;朱玉华;任维 | 申请（专利权）人： | 亚能生物技术(深圳)有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 深圳市博锐专利事务所 44275 | 代理人： | 张明 |
| 地址： | 518000 广东省深圳*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重型 血友病 致病 基因突变 检测 试剂盒 | ||
1.重型血友病A致病基因突变检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括Inv22PCR反应液和Inv1PCR反应液；
1)所述Inv22PCR反应液包括检测重型血友病A致病基因内含子22基因倒位的引物3条，分别为：
引物A22：SEQ ID NO：1；
引物B22：SEQ ID NO：2；
引物C22：SEQ ID NO：3；
2）所述Inv1PCR反应液包括检测重型血友病A致病基因内含子22基因倒位的引物3条，分别为：
引物1F：SEQ ID NO：4；
引物1R：SEQ ID NO：5；
引物2F：SEQ ID NO：6。
2.如权利要求1所述的重型血友病A致病基因突变检测试剂盒，其特征在于，所述Inv22PCR反应液还包括Taq DNA聚合酶抑制剂，所述Inv1PCR反应液还包括Taq DNA聚合酶抑制剂。
3.如权利要求2所述的重型血友病A致病基因突变检测试剂盒，其特征在于，所述Taq DNA聚合酶抑制剂为Taq-Antibody。
4.如权利要求1所述的重型血友病A致病基因突变检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括Inv22阳性参考品、Inv1阳性参考品和阴性参考品，所述Inv22阳性参考品为Inv22杂合子混合质粒，所述Inv1阳性参考品为Inv1杂合子混合质粒，所述阴性参考品为去离子水。
5.根据权利要求1所述的重型血友病A致病基因突变检测试剂盒，其特征在于，
所述的Inv22PCR反应液各组分含量为：
2×GC buffer：25μL；
10mM dATP、dCTP、dTTP的等体积混合液：2.0μL；
10mM dGTP：1.5μL；
10μM引物A22：1.25μL；
10μM引物B22：0.625μL；
10μM引物C22：0.625μL；
5U/μL LA taq DNA聚合酶：1.0μL；
5U/μL Taq-Antibody：1.0μL；
去离子水：11.5μL；
所述的Inv1PCR反应液各组分含量为：
10×PCR buffer：2.5μL；
2.5mM dATP、dCTP、dGTP、dTTP的等体积混合液：4μL；
10μM引物1F：0.5μL；
10μM引物1R：0.5μL；
10μM引物2F：0.5μL；
5U/μL Hotstar Taq酶：1.0μL；
5U/μL Taq-Antibody：0.5μL；
去离子水：13.5μL。
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