[发明专利]一种双手性选择剂毛细管电泳法分离抗溃疡药物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种分离抗溃疡药物的方法，特别是涉及一种双手性选择剂毛细管电泳法分离抗溃疡药物的方法。 

背景技术

毛细管电泳（capillary electrophoresis，CE）因其具有高效、快速、简便等优点又称为高效毛细管电泳（high-performance capillary electrophoresis，HPCE）。它是以高压直流电场为驱动力，以荷电粒子按其分配系数的不同在毛细管内进行分离的一种电泳新技术，具有它具有分离模式多、分离柱效高、分析速度快、操作简便、样品和试剂消耗量少、环境污染小等优点，因而在手性分离研究中备受青睐。 

该方法手性选择剂种类多，常见的选择剂有环糊精、手性冠醚、大环糖肽类抗生素、线性多糖、蛋白质、手性表面活性剂及配体交换复合物等，还可以同时使用多个手性选择剂，利用其协同作用加强分离效果，而且方法简单、快速，成本低。目前，国内外没有采用双手性选择剂毛细管电泳法分离含亚砜基团手性化合物的报道。 

质子泵抑制剂（PPIs）包括泮托拉唑，奥美拉唑，兰索拉唑和泰妥拉唑。PPIs主要用于治疗十二指肠溃疡、胃溃，疡、反流性食管炎等与胃酸分泌相关的疾病。PPIs具有相似的分子结构，分子中具有一个手性硫原子中心，存在R，S两个对映异构体，由于两个对映体具有相似的理化性质，常规的方法很难分离，故临床多以外消旋体的形式使用。然而，诸多临床试验证明，消旋体给药是不合理的，开发单一对映体抗溃疡药物势在必行。目前对此类药物手性分离分析方法已经报道的有手性固定相高效液相色谱法、流动相添加剂高效液相色谱法、配体交换毛细管电泳法、手性添加剂毛细管电泳法，鲜有用双手性选择剂毛细管电泳法来实现分离。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种双手性选择剂毛细管电泳法分离抗溃疡药物的方法。以Cu（Ⅱ）和L-组氨酸配合物及HP-β-CD为手性选择剂，分离分析泮托拉唑、奥美拉唑、兰索拉唑和泰妥拉唑对映体。用于此类抗溃疡手性药物的体内分析和产品光学纯度检测，为此类手性药品的研究开发和单一对映体给药提供技术支持和保障。 

本发明的目的是通过以下技术方案实现的： 

一种双手性选择剂毛细管电泳法分离抗溃疡药物的方法，为一种分离泮托拉唑、奥美拉唑、兰索拉唑和泰妥拉唑消旋体的方法，该方法运用双手性选择剂毛细管电泳法分离拉唑药物对映体，其所用的手性选择剂有两种：一种是Cu（Ⅱ）和L-组氨酸；另一种是羟丙基-β-环糊精，所述方法包括以下步骤：

a. 样品和运行缓冲液的配置：配制样品储备溶液称为取泮托拉唑、奥美拉唑、兰索拉唑和泰妥拉唑消旋体样品粉末10 mg，置10 mL棕色容量瓶中，以过滤后的甲醇溶解并定容至刻度，摇匀；得样品浓度均为1 mg/mL的储备液，-20 ^oC冰箱保存；样品供试溶液：取样品储备液1 mL分别至10 mL棕色容量瓶中，以甲醇定容至刻度，摇匀，得100 μg/mL供试液，4 ^oC冰箱保存；运行缓冲液：依次称取磷酸二氢钠、HP-β-CD、醋酸铜和L-组氨酸0.0195 g、0.05 g、0.050 g、0.0582 g置于50 mL烧杯，加25 mL二次蒸馏水溶解，用0.1 M氢氧化钠溶液和10%磷酸调至pH 5.0，即得运行缓冲液，经0.45 μm微孔滤膜过滤后备用；

b.准备分离仪器：分离过程在石英毛细管中进行，选取内径50μm的毛细管，截取一段长度53 cm，在距端口8 cm处除去毛细管的聚酰亚胺层得到检测窗口，新的毛细管在使用前需冲洗和活化，连续分析时，每次分析前依次用依次10%HCl、1MNaOH、二次蒸馏水和运行缓冲液各冲洗10 min；

c. 进样：进样前设置分离条件，分离电压15 kV，检测波长290 nm；泰妥拉唑306 nm，进样高度10 cm，进样时间10 s，正极进样负极检测；进样间依次用运行缓冲液和二次蒸馏水各冲柱5 min，然后进行下一次进样。

所述的一种双手性选择剂毛细管电泳法分离抗溃疡药物的方法，所述样品操作时运行缓冲液和样品均经0.45 μm微孔滤膜过滤，并超声脱气，样品用甲醇溶解，4℃冰箱保存备用。 

所述的一种双手性选择剂毛细管电泳法分离抗溃疡药物的方法，所述电泳分离泮托拉唑、奥美拉唑、兰索拉唑对映体：运行缓冲液：5 mmol/L磷酸二氢钠含mg/Mlhp-β-CD、15 mmol/L L-组氨酸和10 mmol/L醋酸铜，调至pH 5.0；分离电压：15 kV；紫外检测波长：290 nm。