[发明专利]饲用果胶酶DNS检测法无效
| 申请号： | 201210498606.3 | 申请日： | 2012-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN102998269A | 公开（公告）日： | 2013-03-27 |
| 发明（设计）人： | 王冠;詹志春;徐丽;周樱;丁皓;付大波;周金敏;王晓亮;张庆丽 | 申请（专利权）人： | 武汉新华扬生物股份有限公司 |
| 主分类号： | G01N21/31 | 分类号： | G01N21/31 |
| 代理公司： | 北京法思腾知识产权代理有限公司 11318 | 代理人： | 高宇 |
| 地址： | 430074 湖北省武*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 果胶酶 dns 检测 | ||
【权利要求书】：
1.饲用果胶酶DNS检测法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
（1）吸取果胶粉溶液，加入DNS试剂并振荡，在37℃水浴锅中保温30min，再加入稀释的酶液，混匀，沸水浴煮沸，测定在540nm处测定吸光度AB；
（2）吸取果胶粉溶液，加入与步骤（1）稀释同样倍数的酶液混匀，在37℃水浴中精确保温30min，加入DNS试剂，混匀，沸水浴煮沸，测定在540nm处测定吸光度AS；
（3）酶活计算
酶活X=[(AS-AB)×K+CO]×1000×Df/30/m/M
X：酶样中果胶酶活力，U/mL；AS：待测酶反应液的吸光度；AB：待测酶空白样的吸光度；K：标准曲线的斜率；CO：标准曲线的截距；Df：待测酶样品的稀释倍数；M：半乳糖醛酸的分子量，212.15g/mol；m：待测果胶酶取样量，
其中，对于步骤（1）和步骤（2），
果胶粉溶液的pH为3.5；
果胶粉溶液与酶液的体积比为3：1；
在果胶粉溶液与酶液的混合液中，果胶粉的浓度为2.25mg/mL。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，对于步骤（1）和步骤（2），在沸水浴煮沸的时间为5min，然后用自来水冷却至室温，加水定容并振荡混匀，10000g离心10min。
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