[发明专利]一种萨摩鲁泰的固相合成方法

说明书

技术领域

本发明涉及多肽合成技术领域，特别涉及一种萨摩鲁泰的固相合成方法。

背景技术

糖尿病（diabetes）是由遗传因素、免疫功能紊乱、微生物感染及其毒素、自由基毒素、精神因素等等各种致病因子作用于机体导致胰岛功能减退、胰岛素抵抗等而引发的糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合征，临床上以高血糖为主要特点，典型病例可出现多尿、多饮、多食、消瘦等表现，即“三多一少”症状，一旦控制不好会引发并发症，导致肾、眼、足等部位的衰竭病变，且无法治愈。糖尿病分为妊娠期糖尿病、特异性糖尿病、Ⅰ型糖尿病和Ⅱ型糖尿病。据国际糖尿病联盟数据显示，2007年全球约有2.46亿糖尿病患者，预计2025年将达到3.8亿，即成年人口的7.1％，其中Ⅱ型糖尿病患者约占90%。

Ⅱ型糖尿病，又名非胰岛素依赖型糖尿病（NIDDM），特点是人体自身能够产生胰岛素，但细胞无法对其作出反应，使胰岛素的效果大打折扣。Ⅱ型糖尿病主要通过口服或皮下注射降糖药治疗。针对Ⅱ型糖尿病的降糖药种类很多，胰高血糖样肽-1（GLP-1）的受体激动素是近年来研究的热点。其中，萨摩鲁泰（semaglutide）是GLP-1的受体激动素之一，是由丹麦诺和诺德公司研制的，作为一种每周服用一次的皮下注射制剂，能起到良好的降低血糖的作用，同时还具有减肥的功效，其化学表述为N^ε26-{18-[N-(17-carboxyheptadecanoyl)-L-γ-glutamyl]-10-oxo-3,6,12,15-tetraoxa-9,18-diazaoctad ecanoyl}-[8-(2-amino-2-propanoic acid),34-L-arginine]human glucagon-like peptide 1(7-37)，分子式见式（Ⅰ）所示。

式Ⅰ

目前，多肽的合成主要采用固相合成法，固相合成的优点主要表现在最初的反应物和产物都是连接在固相载体上，因此可以在一个反应容器中进行所有的反应，便于自动化操作，加入过量的反应物可以获得高产率的产物，同时产物很容易分离。

然而，还没有萨摩鲁泰固相合成方法的相关报道，并且萨摩鲁泰在侧链合成过程中需要逐步偶联2-(2-(2-氨乙氧基)乙氧基)乙酸、2-(2-(2-氨乙氧基)乙氧基)乙酸、Glu和十八烷二酸，由于侧链较长，致使空间位阻效应强，偶联反应难于进行，容易导致产品收率低的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种萨摩鲁泰的固相合成方法。该方法，简化了操作步骤，合成周期短，成本低，减少了废液的产生，副产物少，产品收率高，利于萨摩鲁泰的大规模生产。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种萨摩鲁泰的固相合成方法，包括如下步骤：

步骤A：将Gly和树脂偶联得到Gly-树脂；

步骤B：Gly-树脂经第一逐步偶联氨基酸或氨基酸衍生物，得到序列如SEQ ID No.1所示的第一肽树脂；

步骤C：脱除序列如SEQ ID No.1所示的第一肽树脂中Lys的侧链保护基团，经第二逐步偶联2-(2-(2-氨乙氧基)乙氧基)乙酸、2-(2-(2-氨乙氧基)乙氧基)乙酸、Glu和十八烷二酸，获得第二肽树脂；

步骤D：取第二肽树脂经裂解、纯化，即得。

多肽固相合成法是利用树脂作为固相载体合成多肽的方法，过程为：首先将一个氨基被封闭基团保护的氨基酸共价连接在固相载体上，脱掉第一个氨基酸的氨基保护基，这样第一个氨基酸就接到了固相载体上了。然后氨基被封闭的第二个氨基酸的羧基经过活化后，与已接在固相载体的第一个氨基酸的氨基反应形成肽键，这样在固相载体上就生成了一个带有保护基的二肽。重复上述肽键形成反应，使肽链从C端向N端生长，直至达到所需要的肽链长度。最后脱去保护基，水解肽链和固相载体之间的酯键，就得到了合成好的肽。

作为优选，步骤A中树脂为2-CTC树脂或王树脂。

优选地，步骤A中偶联采用的活化剂选自DIC、HOBt和DMAP的混合液，DIEA，TMP或NMM。

作为优选，Lys的侧链保护基为mmt。