[发明专利]低密度脂蛋白中胆固醇的多重定量方法

权利要求书

1.一种用单次测量定量生物样品中的低密度脂蛋白中的胆固醇和总胆固醇的方法，包括：

处理生物样品中除低密度脂蛋白外的脂蛋白以产生过氧化氢的第一步；和

转化第一步中所获得的过氧化氢为醌染料并处理残留的低密度脂蛋白以及转化所产生的过氧化氢为醌染料的第二步，

其中所述醌染料并不在第一步形成，并单次测量根据第二步中形成的醌染料的量由此定量低密度脂蛋白中的胆固醇和总胆固醇。

2.根据权利要求1的方法，其中与醌染料形成相关的试剂组合物包括4-氨基安替比林、酚类或苯胺类氢供体化合物以及过氧化物酶；在第一步中添加4-氨基安替比林、酚类或苯胺类氢供体化合物中的任何一种；在第一步中没有添加的试剂组合物在第二步中添加。

3.根据权利要求1或2的方法，其中在第一步中，在作用于除低密度脂蛋白外的脂蛋白的表面活性剂存在下使胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶作用于生物样品中除低密度脂蛋白外的脂蛋白以产生过氧化氢；并在第二步中，在至少作用于低密度脂蛋白的表面活性剂存在下使胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶作用于生物样品中所含的低密度脂蛋白以产生过氧化氢。

4.根据权利要求1-3任一的方法，其中在第二步中，第一步获得的过氧化氢被转化为醌染料；将至少作用于低密度脂蛋白的表面活性剂添加到测量系统中；使胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶作用于测量系统中残留的低密度脂蛋白；并通过转化为醌染料测量所产生的过氧化氢。

5.根据权利要求1-4任一的方法，其中基于下述的两个值同时测量生物样品中的低密度脂蛋白中的胆固醇和总胆固醇的存在量，所述的两个值为反映总胆固醇存在量的第二步中总吸光度改变量的测量值，以及反映低密度脂蛋白中的胆固醇存在量的相对于第二步中所产生的过氧化氢量的吸光度改变量的测量值。

6.根据权利要求1-5任一的方法，其中第二步中吸光度的改变显示了两相性的增加，其中在添加第二试剂后的快速增加和随后的缓速增加；根据后面吸光度的缓速改变量定量低密度脂蛋白中胆固醇。

7.根据权利要求1-6任一的方法，其中根据第二步中吸光度总的改变量定量总胆固醇。

8.根据权利要求1-7任一的方法，其中在不同的测量条件下，使用供临床化学检验用的自动分析仪单次测量来进行分析。

9.一种稳定根据权利要求1-8任一的方法中所用液体试剂的方法，其中：

在第一步中添加的第一试剂中包含作为与醌染料形成相关的试剂组合物的4-氨基安替比林、酚类或苯胺类氢供体化合物的任意一种；和

在第二试剂中含有4-氨基安替比林、酚类或苯胺类氢供体化合物以及过氧化酶之中未包含在第一试剂中的试剂组合物。

10.根据权利要求9的方法，其中在第一试剂中还含有作用于除低密度脂蛋白外的脂蛋白的表面活性剂、胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶；以及在第二试剂中含有至少作用于低密度脂蛋白的表面活性剂。