[发明专利]相思树花粉离体培养活力检测技术

权利要求书

1.一种相思树花粉离体培养活力检测方法，包括液体培养基的配制、花枝采摘、花粉播种、培养、光学显微镜观察计数发芽花粉等工序；其特征在于：在相思树花开时节，采集含有多穗新鲜花序的花枝，从花枝上摘取当日开放的新鲜花序分切成多段，以水沉法播种，在一定的温度、湿度、富氧环境条件下培养使其发芽，具体操作步骤如下：

(1)液体培养基的配制：用蔗糖、硼酸、硝酸钙、去离子水按一定的浓度混合均匀；

(2)花枝采摘：剪取有多穗已全面开放花序的新鲜花枝，下端插入装有清水的小桶，拿回试验室备用；

(3)花粉播种：取凹玻片平放于桌面，用滴管取配制好的培养基2～3滴滴于凹玻片的凹槽内，用镊子摘取花序以水沉法播种，播种后不盖盖玻片；

(4)花粉培养：取干净大号培养皿，底部垫上滤纸，滴入去离子水将滤纸浸湿，将凹玻片平放入培养皿中，置于一定环境条件下培养； 

(5)光学显微镜观察：培养一定时间后将凹玻片置于光学显微镜下观察花粉发芽状况。

2.根据权利要求1所述的一种相思树花粉离体培养活力检测方法，其特征在于：所述的液体培养基的组分和体积质量浓度是：蔗糖15%～20%，硼酸100mg/L～150 mg/L，硝酸钙0.25 mmol/L～0.5mmol/ L，其余为水。

3.根据权利要求1所述的一种相思树花粉离体培养活力检测方法，其特征在于：所述的花序是指长在花枝上的一穗花，一个花序通常含有近百朵小花。

4.根据权利要求1所述的一种相思树花粉离体培养活力检测方法，其特征在于：所述的新鲜花枝是于早上7点钟前采集，花枝上有多穗花序于当日凌晨全面开放且未被访花昆虫采访的花枝。

5.根据权利要求1所述的一种相思树花粉离体培养活力检测方法，其特征在于：所述的水沉法播种是指从花枝上摘下当日开放的新鲜花序，分切成多段，用镊子断取约有6～9朵小花的花序段，在液体培养基中涮1圈，花粉粒自然沉入液体培养基中。

6.根据权利要求1所述的一种相思树花粉离体培养活力检测方法，其特征在于：所述的环境条件是让培养基中的花粉与空气直接接触而富氧，并控制温度26℃～30℃，湿度85%～90%。

7.根据权利要求1所述的一种相思树花粉离体培养活力检测方法，其特征在于：所述的光学显微镜观察是在花粉培养8小时后进行检测。