[发明专利]转基因大豆A2704-12的LAMP检测引物及方法

权利要求书

1.一种转基因大豆A2704-12的LAMP检测引物，其特征在于：所述LAMP检测引物如下：

外引物F3：5'-GAC ACA TCT CAT TGC ACT GA-3'

外引物B3：5'-CGA GTT CTG TTA GGT CCT CTA-3' 

内引物FIP：5'-TGG CGT AAT AGC GAA GAG GCG TGA GTT ATT TAT CAG CCA AGC-3'

内引物BIP：5'-GGA TGT GCT GCA AGG CGA TTT ACA ACG TCG TGA CTG G-3'

环引物LF：5'-CCG CAC CGA CAT AAG AAG A-3'

环引物LB：5'-AAG TTG GGT AAC GCC AGG-3'。

2.一种转基因大豆A2704-12的LAMP检测方法，其特征在于：利用权利要求1所述的LAMP检测引物，以BstDNA聚合酶大片段启动环介导等温扩增，通过观察浊度，或加入显色液观察颜色变化来判定检测结果。

3.根据权利要求2所述的转基因大豆A2704-12的LAMP检测方法，其特征在于：环介导等温扩增的反应条件为：63℃温育1h，80℃保温5min；反应体系为：10 ×ThermoPol缓冲液2.5μL，10 μmol/L外引物F3 0.5μL，10 μmol/L外引物B3 0.5μL，40 μmol/L环引物LF 0.5μL，40 μmol/L环引物LB 0.5μL，40 μmol/L内引物FIP 1.0μL，40 μmol/L内引物BIP 1.0μL，10 mmol/L dNTPs 4.0μL，5 mol/L甜菜碱 6.0μL，150 mmol/L硫酸镁1.0μL，8 U/μL Bst DNA聚合酶大片段1.0μL，100 ng/μL DNA模板2.0 μL，ddH₂O  4.5μL。