[发明专利]藻蓝多糖绿啤及酒类和饮料及其制备方法

权利要求书

1.一种藻蓝多糖绿啤的制备方法，其特征在于，所述藻蓝多糖绿啤的制备方法首先由将螺旋藻纯多糖、螺旋藻藻蓝素和竹叶叶绿素，按比例添加，和食用酒精及蒸馏水混合搅拌，通过巴氏消毒杀菌制成藻蓝多糖提取液，然后，将此提取液按比例添加到啤酒中，成为功能型的绿啤；

所述藻蓝多糖提取液的成分按重量比分别为：螺旋藻纯多糖占2％-16％，螺旋藻藻蓝素占0.5％-10％，竹叶叶绿素占1-20％，食用酒精占5-15％，蒸馏水占39-91.5％，其总量比例为100％；

其中，所述螺旋藻纯多糖的提取是先提取螺旋藻粗多糖，并从粗多糖中分离蛋白质，经纯化获得螺旋藻多糖单一纯品；所述提取螺旋藻粗多糖的具体工艺为：先将螺旋藻干粉进行破壁处理，用低极性溶剂去亲脂性成分，经热水抽提或碱液冷提取或采用微波辅助提取，取上清液浓缩，乙醇醇析后离心、干燥得螺旋藻粗多糖；所述从粗多糖中分离蛋白质为利用胰蛋白酶和木瓜蛋白酶的双酶法进行多糖提取工艺，测得残留的蛋白质含量为3％；所述纯化是通过水提液抽提所得到的粗多糖含有的多个混合糖组分及小分子杂质，进一步分级纯化得到螺旋藻多糖单一纯品；

所述藻蓝素是开链的四吡咯化合物，多与蛋白质通过硫醚键结合在一起；按现有方法提取藻胆蛋白后，在0.1mol/L，pH＝7.0磷酸缓冲溶液透析48h，低温浓缩，95％乙醇沉淀，离心，依次用石油醚、丙酮、甲醇洗至无色；真空干燥得变性藻胆蛋白；称取5g所述变性藻胆蛋白，加入1000ml甲醇，恒温40℃，搅拌24h，抽滤，滤液浓缩至干、残留物溶解在8～10ml含2.5％甲醇的氯仿溶液中，离心，上清液在25℃旋转蒸发至干，残留物溶解在2ml含2.5％甲醇的氯仿溶液中，7倍体积的石油醚沉淀所述藻蓝素，石油醚洗涤，得到所述藻蓝素。

2.根据权利要求1所述的一种藻蓝多糖绿啤的制备方法，其特征在于，所述螺旋藻多糖的制备方法采用的胰蛋白酶、木瓜蛋白酶双酶法进行多糖提取工艺如下：选用螺旋藻粉→配成12％的藻粉溶液→胰蛋白酶水解→木瓜蛋白酶水解→真空浓缩→酒精沉淀→丙酮洗涤→冷冻干燥→多糖粗制品→离子交换层析→透析→凝胶层析→冷冻干燥真空浓缩：在70-80℃真空浓缩至含固形物20％；酒精沉淀分离，在浓缩液中加入5倍体积的95％乙醇，使螺旋藻多糖呈絮状沉淀析出，大部分蛋白质和其它成分保留在溶液中，4000r/min离心15min得沉淀，得到2个多糖组分，其中，组分1的单糖组成为D-葡萄糖、D-木糖、D-半乳糖和葡萄糖醛酸；组分2的单糖组成为：D-葡萄糖、D-甘露糖、L-鼠李糖、D-半乳糖和葡萄糖醛酸。

3.根据权利要求1所述的一种藻蓝多糖绿啤的制备方法，其特征在于，所述胰蛋白酶水解的胰蛋白酶作用温度为55℃，胰蛋白酶作用pH值在6.2-7.2胰蛋白酶保温时间为2.5h，酶用量为3.0％；所述木瓜蛋白酶进行二次水解的加酶量3％，pH值6.5，作用温度为40℃，保温20h。

4.根据权利要求2所述的一种藻蓝多糖绿啤的制备方法，其特征在于，所述离子交换层析分离多糖采用20X1cm的DEAE-Sepharose柱进行多糖分离：用0.01mol/L、pH8.0的吡啶-盐酸缓冲液平衡离子交换柱，粗多糖的上样量为8ml，流速为25ml/h，用0.01mol/L、pH8.0的吡啶-盐酸缓冲液及0-2mol/L的NaCl进行梯度洗脱，分别收集，冷冻干燥得组分1和组分2。