[发明专利]一种茶皂素脱色酶及其制备方法

权利要求书

1.一种茶皂素脱色酶，其特征在于：所述茶皂素脱色酶以黄孢原毛平革菌为生产菌种，接种于液体生产培养基中经发酵、超声波提取、沉淀、干燥后获得；所述液体生产培养基各组分组成为：葡萄糖20-50 g/l，硫酸锰0.01-0.05 g/l，硝酸钠0.8-1.5 g/l，硫酸镁2-8 g/l，茶皂素0.2-0.8 g/l，余量为水。

2.一种茶皂素脱色酶的制备方法，其特征在于：所述制备方法步骤如下：

（1）菌种培养：采用黄孢原毛平革菌作为生产菌种，依次经斜面种子培养基、液体种子培养基培养后，获得液体种子；

（2）发酵生产：将液体种子用无菌蒸馏水稀释，得到浓度为1′10⁷-10⁸个/ml液体种子孢子悬浮液，然后将液体种子孢子悬浮液与液体生产培养基按0.5-3:100的体积比混合均匀，置于28-30℃摇床中发酵培养96-100 h，过滤，得到含茶皂素脱色酶的菌丝体；

（3）茶皂素脱色酶提取：含茶皂素脱色酶的菌丝体以1:1的重量比加无菌水，在冰浴中超声破碎，离心，取上清液加入4-5倍体积的丙酮在-20℃下沉淀蛋白3-4h后进行冷冻离心，得到的沉淀在室温下风干，得到茶皂素脱色酶。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述液体生产培养基各组分组成为：葡萄糖20-50 g/l，硫酸锰0.01-0.05 g/l，硝酸钠0.8-1.5 g/l，硫酸镁2-8 g/l，茶皂素0.2-0.8 g/l，余量为水。

4.根据权利要求2或3所述的制备方法，其特征在于：步骤（3）所述离心条件为：4000 -5000r/min转速下离心10-15min。