[发明专利]一种茶皂素脱色酶及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及微生物发酵和酶工程技术领域，特别涉及一种茶皂素脱色酶及其制备方法。

背景技术

茶皂素是从山茶科植物中提取得到的五环三萜类糖苷化合物，是一种性能优良的非离子表面活性剂，具有较强的乳化、分散、湿润、起泡、稳泡等作用，可广泛应用于轻工、化工、农药、饲料、纺织、矿产和建筑等领域，用于制造乳化剂、洗涤剂、农药助剂、饲料添加剂、纺织助剂和阻凝剂等。目前使用较多的为茶皂素粗提物经喷雾干燥得到的粉末，其中含有大量的美拉德色素、多酚和黄酮类色素物质，5%的茶皂素粗提物的水溶液为颜色较深的棕褐色，严重影响到了其推广应用，如：茶皂素对草甘膦等多种农药具有良好的增效作用，但由于颜色问题影响了产品的外观，从而导致添加茶皂素的产品无法达到国外产品标准；茶皂素在应用于洗涤用品时对色泽的要求就更为苛刻，尤其是在高档日化用品中的应用更是受到了限制，目前国内有1~2家茶皂素企业尝试打入日本和我国台湾地区日化用品市场，但由于无法做到他们的色泽要求，只能以粗产品形式出售（对方通过自有技术脱色后再利用），产品价格和利润均不理想。

国内对茶皂素的脱色研究主要采用物理和化学方法，如丁姗姗等利用大孔吸附树脂NKA-Ⅱ对茶皂素粗提物进行脱色研究，结果表明NKA-Ⅱ树脂具有较高的吸附和解吸能力，在40℃下NKA-Ⅱ树脂对茶皂素的吸附等温线符合Frundlich方程；经过动态吸附解吸后，提取物中茶皂素含量由600 mg/g提高到861.3 mg/g，脱色后的茶皂素样品在可见光区的吸收强度降低（利用大孔吸附树脂对茶皂素粗提物脱色的研究，丁姗姗等，《食品与机械》2012年第04期）。刘昌盛等采用白土、活性炭、H₂O₂和EDTA四种脱色剂对茶皂素进行脱色比较实验，结果表明白土和活性炭脱色效果要比H₂O₂差，经白土脱色的茶皂素较为浑浊，活性炭脱色后过滤较为困难，且有10%以上的茶皂素损失，H₂O₂和EDTA混合使用效果和单独使用H₂O₂效果相近，而且脱色时仅有0.97%茶皂素损耗；经分析对比，得出最佳脱色条件为：脱色温度70℃、脱色时间90 min、H₂O₂加入量为4%、溶液pH值为10（茶皂素脱色工艺研究，《粮食与油脂》2004年 第12期）。孙冀平等采用活性炭、活性白土、H₂O₂、NaClO和NH₃·H₂O (10%)进行脱色试验，结果表明，NaClO法脱色时间短，操作条件要求低，但在加热条件下极易回色，且产品有刺激性气味；氨水脱色效果极差，对茶皂素的颜色几乎无任何影响；茶皂素会吸附于活性白土和活性炭，造成损失过大；H₂O₂脱色效果最好，正交实验得出最佳操作条件为：温度60℃，时间90 min，H₂O₂（30%）加入量为5 mL（茶皂素的脱色研究，《中国油脂》2003年 第4期）。

上述方法虽然对茶皂素的脱色进行了物理和化学脱色方法的研究，但存在的问题是：或者需要较高的温度和在强碱条件下会对操作者产生伤害并对环境产生污染，或者由于吸附作用造成茶皂素很大的损失和回收困难，这些问题都阻碍了茶皂素脱色的产业化，而对于绿色环保的生物酶脱色茶皂素的工艺仍未见相关报道。

 

发明内容

本发明的目的在于解决现有技术中所存在的或者在强碱条件下会对操作者产生伤害并对环境产生污染，或者由于吸附作用造成茶皂素很大的损失和回收困难的问题，提供一种茶皂素脱色酶，对环境友好，生产成本低，用于茶皂素脱色时脱色条件温和，脱色后茶皂素损失率低，且茶皂素回收简便。

本发明还提供了该茶皂素脱色酶的制备方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是： 

一种茶皂素脱色酶，所述茶皂素脱色酶以黄孢原毛平革菌为生产菌种，接种于液体生产培养基中经发酵、超声波提取、沉淀、干燥后获得；所述液体生产培养基各组分组成为：葡萄糖20-50 g/l，硫酸锰0.01-0.05 g/l，硝酸钠0.8-1.5 g/l，硫酸镁2-8 g/l，茶皂素0.2-0.8 g/l，余量为水。