[发明专利]改良的凝血因子调节物

说明书

本申请是申请号为200580019913.7(国际申请号为PCT/US2005/013926)、申请日为2005年4月22日、发明名称为“改良的凝血因子调节物”的中国专利申请的分案申请。

发明领域

本申请要求2004年4月22日提交的美国临时申请第60/564,873号的优先权。

本发明是改良药物、组合物以及用核酸配体(例如适体)调节凝血因子药理学活性的方法。

背景技术

尽管治疗和预防血栓形成事件相当努力，但动脉血栓形成仍旧是发达国家成年人群的主要死因。虽然存在众多治疗血栓形成的医疗策略，但没有药物能满足生物利用度和效力二者的治疗终点，同时又具有合理的安全特性(参见Feuerstein等(1999)Arterioscler.Thromb.Vase.Biol.19:2554-2562)。

在正常环境下，对铺衬血管的血管内皮细胞的伤害通过一系列通常称为凝血“级联”的事件触发止血反应。级联最终将可溶性纤维蛋白原转变成不溶性纤维蛋白，其与血小板一起形成局部凝块或血栓，阻止血管外释放血液组分。然后，可发生伤口愈合，接着凝块溶解，并恢复血管完整性和流量。

凝血的发生起因于两个不同的途径：内在途径和外在途径。可通过使血液携带的因子接触人造负电荷表面(如玻璃)体外触发内在途径。相反，当受伤后一般与循环系统隔绝的组织因子(TF)开始接触血液时，可体内或体外启动外在途径。接触血液的TF作为VIIa因子(“FVIIa”)的辅因子，催化IX因子(“FIX”)和X因子(“FX”)活化。这导致快速形成FXa和凝血酶，其随后聚合，形成纤维蛋白凝块。内在途径和外在途径二者的特征在于在前凝血剂表面上组装多种蛋白复合物，这使对伤害部位的反应局部化(参见Mann,K.G.等(1990)Blood 76:1)。

抗凝疗法

香豆素药物，例如华法林以及糖胺聚糖、肝素和硫酸乙酰肝素，经常用作抗凝血剂。华法林是一种香豆素衍生物，通过与凝血酶原和其它维生素K依赖性凝血因子的维生素K依赖性翻译后修饰竞争起作用。其作用比肝素稍微慢，持久作用稍微长。香豆素药物通过抑制凝血酶与VII、IX和X因子以及蛋白C和S的功能所必需的维生素K依赖性羧化反应来抑制凝血。这些药物通过抑制维生素K的醌衍生物还原为其活性氢醌形式而起作用。因为香豆素药物的作用模式，所以实现其最大作用需要几天。肝素结合并活化抗凝血酶III，其然后抑制凝血级联的丝氨酸蛋白酶。肝素和LMW肝素部分地由于其效力而存在缺点。在达7%的接受持续输注的患者中和达14%的给予间歇性推注单次剂量的患者中，观察到的主要并发症是不受控的出血。达到效力而没有置患者于出血风险的治疗范围狭窄，约1至小于3μg肝素/ml血浆。在4μg/ml以上的肝素浓度未检测到凝血活性。因此，必须非常小心地将患者的血浆浓度保持在治疗范围内。

有些团队使用凝血因子抗体调节凝血级联。例如授予Schering Aktiengesellschaft的PCT公开号WO 03/093422公开了以比对单独组织因子(TF)大的亲和力结合VIIa因子/组织因子(FVIIa/TF)复合物的抗体。宣称这些抗体不与VII因子和X因子竞争结合组织因子，并抑制FX活化。

授予Hamilton Civic Hospitals Research Development Inc.的美国专利第6,001,820号提供了肝素辅因子II特异性催化剂，其能够(1)选择性失活结合凝块中纤维蛋白或某些其它表面的凝血酶，但对游离凝血酶仅具有最小抑制活性；(2)抑制内在Tenase复合物组装，和由此的通过IXa因子活化X因子；和(3)抑制通过XIa因子活化IX因子。

适体

常规上一般认为核酸在生物过程中主要起提供信息的作用。在过去的十年，已经清楚核酸的三维结构可带给其与蛋白相互作用并调节蛋白的能力。这种核酸配体或“适体”是可以高亲和性和特异性结合特定配体的短DNA或RNA寡聚体。作为一个类别，适体的三维结构是充分可变的，以允许适体结合和充当实际上任意化合物的配体，无论是单体还是聚体。适体已显现为有前景的新诊断和治疗化合物，特别是在癌症治疗和凝血调节中。