[发明专利]一种制备奈帕坦特及其中间体的方法及所述中间体

权利要求书

1.一种制备奈帕坦特的方法，包括以下步骤：

1)以一种树脂P作为载体，按照Fmoc固相合成方法顺序地偶联以下6种物质得到肽树脂，即

Fmoc-Leu-Dap(Alloc)-Phe-Trp(Boc)-Asp(OAll)-Asp(P)-OMe：

-Fmoc-Asp-OMe

-Fmoc-Asp(OAll)-OH

-Fmoc-Trp(Boc)-OH

-Fmoc-Phe-OH

-Fmoc-Dap(Alloc)-OH

-Fmoc-Leu-OH

2)将肽树脂

Fmoc-Leu-Dap(Alloc)-Phe-Trp(Boc)-Asp(OAll)-Asp(P)-OMe内环化，得到肽树脂

3)将肽树脂脱保护并环化，得到肽树脂

4)裂解肽树脂，得到脱保护的双环肽

5)在液相条件下将双环肽与乙酰氨基葡萄糖胺反应，得到奈帕坦特；

其中Fmoc为9-芴甲氧羰基，与氨基相连或与羧基所连的碳原子上的氮原子相连。

2.权利要求1的方法，还包括纯化奈帕坦特的步骤，纯化优选通过重结晶方法或HPLC而进行。

3.权利要求1的方法，其中步骤1)-4)在固相反应柱中进行；且其中步骤1)-5)均在室温和常压下进行；所述树脂载体为2-CTC树脂或王树脂，树脂替代度为0.2-1.2mmol/g，优选为0.5-1.1mmol/g，更优选为0.6-1.0mmol/g。

4.权利要求1的方法，其中步骤2)所用的脱保护试剂为Pd(PPh₃)₄/一苯基硅烷体系；步骤3)所用的脱保护试剂为DBLK，和/或无机碱的醇溶液，优选为碱金属氢氧化物的醇溶液，例如10％的NaOH/CH₃OH；步骤1)-3)所用的偶联剂为DIPCDI、A、或其结合，或者为DIPEA、A、B或其结合，其中A为HOBt或者为选自HOAt，B为PyBOP、PyAOP、HATU、HBTU和TBTU中的一种；步骤1)-3)的偶联或环化的反应时间为1-6小时，优选2-5小时；优选地，偶联或环化之前，将各步骤的肽树脂中的羧基进行活化，活化在冰水浴中进行；活化剂优选为DIPEA或DIPCDI。

5.权利要求1的方法，其中裂解试剂为TFA、TIS和H₂O的混合物，其中TFA∶TIS∶H₂O的体积比优选为90-95∶0-4∶1-6。

6.权利要求1的方法，其中步骤5)在PyBOP和NMM的存在下进行。

7.权利要求1的方法，其中乙酰氨基葡萄糖胺为GlcNHAc或Glc(OAc)₃NHAc。

8.权利要求1的方法，其中所述液相条件通过加入一种溶剂中而实现，所用溶剂为非质子性溶剂，优选THF、DCM、DMF、或其结合。

9.一种制备奈帕坦特中间体的方法，包括以下步骤：

1)以一种树脂P作为载体，按照Fmoc固相合成方法顺序地偶联以下6种物质得到肽树脂，即

Fmoc-Leu-Dap(Alloc)-Phe-Trp(Boc)-Asp(OAll)-Asp(P)-OMe：

-Fmoc-Asp-OMe

-Fmoc-Asp(OAll)-OH

-Fmoc-Trp(Boc)-OH

-Fmoc-Phe-OH

-Fmoc-Dap(Alloc)-OH

-Fmoc-Leu-OH

2)将肽树脂

Fmoc-Leu-Dap(Alloc)-Phe-Trp(Boc)-Asp(OAll)-Asp(P)-OMe内环化，得到肽树脂

3)将肽树脂脱保护并环化，得到肽树脂

4)裂解肽树脂，得到脱保护的双环肽即奈帕坦特中间体；

其中Fmoc为9-芴甲氧羰基，与氨基相连或与羧基所连的碳原子上的氮原子相连；

其中各步骤反应条件如权利要求3-5所述。

10.一种奈帕坦特中间体