[发明专利]一种适应玉米淀粉污水做培养基碳源的枯草芽孢杆菌筛选和可湿粉剂的生产方法

权利要求书

1.一种适应淀粉污水做培养基碳源的枯草芽孢杆菌菌株（Bacillus subtilis）XWJLSP-1，已于2012年8月28日在中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCC No.6478。

2.如权利要求1所述的枯草芽孢杆菌XWJLSP-1的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）培养基的制备：

a．富集用液体培养基：玉米淀粉过程污水10-15% 、玉米浆1-15%（w/w）及 NaCl 10.0g/L、碳酸钙粉10-50g/L， pH 值 7.0~7.2，

b．分离培养基： 含有2% 琼脂的富集用液体培养基a ；

（2）菌种的分离：

a．取土壤溶液煮沸 10~30min，然后取100μL加入富集用液体培养基中，振荡培养 15-20h ；

b．取100ul富集后的培养液加入富集用液体培养基中，振荡培养 15-20h，重复2-10次；

c．将最后一次富集培养液10³-10⁹倍梯度稀释，用划线分离法在分离培养基上分离芽孢杆菌；

d．选取分离得到的菌落纯化、斜面保藏、鉴定。

3.如权利要求1所述的枯草芽孢杆菌XWJLSP-1的可湿粉剂的生产方法，其特征在于，操作步骤和工艺条件如下：

    (1)取淀粉污水10-15%、玉米浆0.5-1%、硫酸镁 0.5%（w/w）及碳酸钙粉20g/L制成发酵培养基；

(2)向培养基罐内通入无菌空气，通气量(VVm)为0.5-1.0，搅拌速度为100-300 r/min，培养温度为32-39 ℃；    

(3)培养15-20小时，当培养液中的菌体数量达到1× 10 ¹⁰· ml ^-1以上后，加入发酵液10%（w/v）的填充材料，所述填充材料由硅藻土90%、羧甲基纤维素10%构成；

(4)将发酵液减压蒸发到含水量为60%时，进行喷雾干燥得到成品枯草芽孢杆菌可湿粉制剂。

4.根据权利要求3所述的枯草芽孢杆菌XWJLSP-1的可湿粉剂的生产方法，其特征在于所说的发酵培养基中，淀粉污水含固量为5%-20%，玉米浆含量为5%-15%，硫酸镁含量为2%-5%（w/w）。