[发明专利]贝类包拉米虫和派琴虫的二重荧光定量RT-PCR检测试剂盒

权利要求书

1.检测贝类包拉米虫和派琴虫的二重荧光PCR的引物组，由引物1、引物2、引物3和引物4组成；

所述引物1、所述引物2、所述引物3和所述引物4的核苷酸序列分别依次为序列表中的序列1、序列2、序列4和序列5。

2.检测贝类包拉米虫和派琴虫的二重荧光PCR的试剂A，由权利要求1所述的引物组、探针A和探针B组成；

所述探针A的核苷酸序列为序列表中的序列3，且所述探针A的5’端标记有报告荧光染料A，3’端标记有淬灭荧光染料C；

所述探针B的核苷酸序列为序列表中的序列6，且所述探针B的5’端标记有报告荧光染料B，3’端标记有淬灭荧光染料D。

3.根据权利要求2所述的试剂A，其特征在于：

所述报告荧光染料A为ROX，

所述报告荧光染料B为FAM；

所述淬灭荧光染料C为ECLIPSE1；

所述淬灭荧光染料D为ECLIPSE2；

所述试剂中所述引物1、所述引物2、所述探针A、所述引物3、所述引物4和所述探针B的摩尔比为2:2:2:1:1:1。

4.检测贝类包拉米虫和派琴虫的二重荧光PCR试剂B，由权利要2或3所述的试剂A、PCR扩增缓冲液和水组成。

5.根据权利要求4所述的试剂B，其特征在于：

所述引物1、所述引物2和所述探针A在所述试剂B中的浓度均为0.4μM；

所述引物3、所述引物4和所述探针B在所述试剂B中的浓度均为0.2μM。

6.检测贝类包拉米虫和派琴虫的二重荧光PCR的试剂盒，包括权利要求1所述的引物组或权利要求2或3所述的试剂A或权利要求4或5所述的试剂B。

7.权利要求1所述的引物组或权利要求2或3所述的试剂A或权利要求4或5所述的试剂B或权利要求6所述试剂盒在制备检测和/或辅助检测待测样品中是否含有包拉米虫和/或派琴虫产品中的应用。

8.根据权利要求7所述应用，其特征在于：所述检测和/或辅助检测待测样品中是否含有包拉米虫和/或派琴虫为用权利要求2或3所述的试剂A或权利要求4或5所述的试剂B或权利要求6所述试剂盒对所述待测样品进行二重荧光PCR反应。