[发明专利]一种制备阿尼芬净的方法

权利要求书

1.一种制备阿尼芬净的方法，该方法包括下述步骤：

（1）由Fmoc-P-OH与2-CTC树脂反应得到得到Fmoc-P-树脂，其中P-OH代表结构如下的带有保护基的非天然氨基酸：

（2）以Fmoc-P-树脂为载体，采用固相多肽合成方法从C端到N端逐一偶联上带有Fmoc保护基的氨基酸，得到全保护肽树脂，其中带有Fmoc保护基的氨基酸依次为(2S，3S，4S)-N-Fmoc-3-乙酰氧基-4-甲基-脯氨酸、(4R)-Fmoc-O-乙酰基-L-苏氨酸、(4S)-N-Fmoc-4-乙酰氧基-4-(4’-乙酰氧基)苯基-L-苏氨酸、(4R)-N-Fmoc-4-乙酰氧基-L-脯氨酸和(4R)-N-Fmoc-O-乙酰基-L-苏氨酸；

（3）对步骤（2）中的全保护肽树脂进行裂解，得到全保护肽；

（4）对步骤（3）中的产物进行分子内反应得到全保护环肽；

（5）脱除步骤（4）中全保护环肽中氮上的Boc保护基；

（6）将步骤（5）的产物与侧链P1进行液相缩合，得到带保护基的米卡芬净，其中P1的结构为：

（7）脱除步骤（6）的产物中羟基上的保护基得到阿尼芬净粗肽。

2.权利要求1的方法，其中步骤（1）中的Fmoc-P-CTC树脂是在碱性条件下将Fmoc-P-OH与替代度为0.2-1.1mmol/g，优选0.4-1.0mmol/g，更优选0.7mmol/g的2-CTC树脂反应制备的；其中所述碱为DIPEA或TMP，优选DIPEA。

3.权利要求1的方法，其中Fmoc-P-OH是从化合物Boc-4-烯-L-鸟氨内酰胺出发，通过Sharpless不对称双羟基化反应、内酰胺水解反应及加乙酰基保护基的方法制备。

4.权利要求1的方法，其中步骤（2）和步骤（4）在偶联剂的存在下进行，所述偶联剂为DIPCDI和化合物A的组合物或DIPEA和化合物A和化合物B的组合物，其中化合物A为HOBt或HOAt，化合物B为PyBOP、PyAOP、HATU、HBTU或TBTU；步骤（2）中的偶联剂为DIPCDI和A的组合物，其中偶联剂中各成分的比例以摩尔比计为DIPCDI:A=1.2:1.1；步骤（4）中的偶联剂为DIPEA和PyBOP和HOAt的组合物，其中偶联剂中各成分的比例以摩尔比计为DIPEA：PyBOP：HOAt=2.0:1.1:1.0。

5.权利要求1的方法，其中在步骤（2）中的非天然氨基酸(4S)-N-Fmoc-4-乙酰氧基-4-(4’-乙酰氧基基)苯基-L-苏氨酸从化合物对苄氧基苯甲醛出发，通过醛和叶立德的缩合反应、Sharpless不对称双羟基化反应、内酰胺水解反应及加乙酰基保护基的方法制备。

6.权利要求1的方法，其中步骤（3）在裂解液的存在下进行，所述裂解液为TFE和DCM的混合溶液，其中各成分的比例以体积比为TFE:DCM=1:4。

7.权利要求1的方法，其中步骤（5）中，脱除Boc保护基所用试剂为TFA或HCl与PhOMe或DCM的混合溶液，优选TFA与PhOMe的混合溶液，其中各成分的比例以体积比为TFA:PhOMe=97:3。

8.权利要求1的方法，其中步骤（7）中脱除保护基的反应可在碱性条件下进行，所述碱性条件为NaOMe和MeOH、NaOEt和MeOH、NaOMe和EtOH、NaOEt和EtOH，优选NaOMe和MeOH，其中NaOMe和MeOH的含量为每100ml MeOH含15-25g NaOMe，优选含16-19gNaOMe，更优选含17g NaOMe。

9.权利要求1-8中任一项的方法，还包括阿尼芬净的纯化步骤。

10.权利要求9的方法，其中纯化步骤采用反相高压液相色谱法，包括：以反相十八烷基硅烷为固定相，以0.2%醋酸水溶液/乙腈为流动相，收集目的峰馏分，浓缩冻干。