[发明专利]一种制备阿尼芬净的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种制备棘白菌素类抗真菌药物的方法，具体涉及一种制备阿尼芬净的方法。

背景技术

棘白菌素类药物是新型的半合成抗真菌药物，其通过抑制β-1,3-葡聚糖合成酶的活性从而抑制真菌细胞壁的合成，具有低毒性和良好的动力学性质。阿尼芬净（Anidulafungin）第三代棘白菌素类抗真菌药物，商品名Eraxis，2006年12月在美国上市，用于以下真菌感染：1）念珠菌血症及其他类型的念珠菌感染（腹腔脓肿、腹膜炎）；2）食管念珠菌。

阿尼芬净的结构如下所示：

目前，阿尼芬净主要通过半合成的方法制备：通过酶反应脱除棘白菌素抗生素结构中环外酰胺的酰基，再通过液相反应在游离胺上连接侧链（参见CN 100335122、WO0051564）。该方法的缺点是依赖棘白菌素类抗生素为原料基础，需要微生物培养技术的支持。迄今为止，尚没有对米卡芬净进行全合成的报道。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种制备阿尼芬净的新方法，具体提供一种阿尼芬净的固相-液相全合成方法，其包括下述步骤：：

（1）由Fmoc-P-OH与2-CTC树脂反应得到Fmoc-P-树脂，

其中P-OH代表结构如下的带有保护基的非天然氨基酸：

（2）以Fmoc-P-树脂为载体，采用固相多肽合成方法从C端到N端逐一偶联上带有Fmoc保护基的氨基酸，得到全保护肽树脂，其中带有Fmoc保护基的氨基酸依次为(2S，3S，4S)-N-Fmoc-3-乙酰氧基-4-甲基-脯氨酸、(4R)-N-Fmoc-O-乙酰基-L-苏氨酸、(4S)-N-Fmoc-4-乙酰氧基-4-(4’-乙酰氧基)苯基-L-苏氨酸、(4R)-N-Fmoc-4-乙酰氧基-L-脯氨酸和(4R)-N-Fmoc-O-乙酰基-L-苏氨酸；

（3）对步骤（2）中的全保护肽树脂进行裂解，得到全保护肽；

（4）对步骤（3）中的产物进行分子内反应，得到全保护环肽；

（5）脱除步骤（4）中全保护环肽中氮上的Boc保护基；

（6）将步骤（5）的产物与侧链P1进行液相缩合，得到带保护基的米卡芬净，其中P1的结构为：

（7）脱除步骤（6）的产物中羟基上的保护基得到阿尼芬净粗肽；

本发明所述步骤（1）的反应在碱性条件下进行。所述碱为DIPEA或TMP，优选DIPEA。CTC树脂的替代度为0.2-1.1mmol/g，优选0.4-1.0mmol/g，更优选0.7mmol/g。

本发明所述步骤（1）中的Fmoc-P-OH是从文献已知的化合物Boc-4-烯-L-鸟氨内酰胺（Journal of Organometallic Chemistry 691(2006)5487-5496，实验部分4.3.3化合物24）出发，通过有机合成领域众所周知的不对称双羟基化反应、内酰胺水解反应及加乙酰基保护基的方法制备。其中内酰胺水解反应和加乙酰基保护基的方法可采用现有技术已知的可实现该目的的任意方法；其中不对称双羟基化反应优选Sharpless不对称双羟基化反应。

本发明所述步骤（2）中，所述固相多肽合成方法包括：1）脱除Fmoc，接着用溶剂洗涤树脂，直至用检测方法检测到完全脱除Fmoc为止；2）将合适量的待偶联氨基酸和偶联剂在溶剂中溶解并活化后，一起加入到固体反应柱中，直至用检测方法检测到反应终止为止；3）重复1）和2）。

其中脱除Fmoc的试剂可为本领域已知的可实现该目的的任何试剂，优选20%的哌啶/DMF溶液（DBLK），即哌啶：DMF（体积比）为1:4的混合溶液。

本发明所述步骤（2）中的偶联剂为DIPCDI和化合物A的组合物或DIPEA和化合物A、化合物B的组合物，其中化合物A为HOBt或HOAt，化合物B为PyBOP、PyAOP、HATU、HBTU或TBTU，优选为DIPCDI和A的组合物。进一步地，偶联剂中各成分的比例以摩尔比计为DIPCDI:A=2.1:1.1、DIPEA:A:B=2.0:1.1:1.0。

本发明所述步骤（2）的反应在固相反应柱中进行。对固相反应柱无特别限制，可为可实现此目的的任意固相反应柱。此外，每种氨基酸进行偶联反应的时间通常为1.5-4小时，优选2-2.5小时；压力优选为常压，也可在适当提高或降低的压力下进行；温度优选为室温（即20±5℃），也可在适当提高或降低的温度下进行。