[发明专利]一种通过花药培养获得百脉根再生植株的方法

权利要求书

1.一种通过花药培养获得百脉根再生植株的方法，包括外植体的准备、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化培养、芽生根的步骤，其特征在于：

a.外植体的准备：选单核靠边期的花药灭菌处理备用；

b.愈伤组织的诱导：无菌环境下剥出花药，接种于愈伤组织诱导培养基上，该培养基的配方为NB+2,4-D 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L +KT 2.0 mg/L，蔗糖90 g/L，琼脂6 g/L，pH 5.8；接种密度为40-50个/皿，用封口膜封口后，放置于生化培养箱25 ℃暗培养至长出愈伤组织，然后利用NB+NAA 0.3 mg/L + 2,4-D 0.3 mg/L，蔗糖30 g/L，琼脂6 g/L，pH 5.8继代培养，培养条件：温度25±2 ℃，16 h光照、8 h黑暗，湿度50-70 %，光照强度1500-2000 lx；

c. 愈伤组织的分化培养：将愈伤组织继代2-3次，每次15 d；然后转入愈伤组织分化培养基，诱导芽的分化；分化培养基的配方为MS+ KT 1.5 mg/L+ NAA 0.5 mg/L，蔗糖30 g/L，琼脂6 g/L，pH 5.8；培养条件：温度25±2 ℃，16 h光照、8 h黑暗，湿度50-70%，光照强度2000-2500 lx；

d.生根培养：分化培养30 d后，将产生的不定芽转入MS基本培养基进行不定芽复壮培养；不定芽长至2-3 cm时转入1/2 MS+0.5 mg/L NAA，蔗糖10 g/L，琼脂6 g/L，pH 5.8的培养基进行生根培养；培养条件为：温度25±2 ℃，16 h光照、8 h黑暗，湿度50-70 %，光照强度2500-3000 lx。