[发明专利]一种用于检测宫颈癌致癌基因的引物探针、试剂盒及用于非检测疾病目的的检测方法

权利要求书

1.一种用于检测宫颈癌致癌基因的探针，其特征在于，包括捕获延伸探针、标记延伸探针和预放大探针；

其中，所述标记延伸探针的序列如SEQ ID No.1、2、7、8、13、14、19、20、25、26、31、32、37、38、43、44、49、50、55、56、61、62、67、68、73、74中任一序列所示；

所述捕获延伸探针的序列如SEQ ID No.3、4、9、10、15、16、21、22、27、28、33、34、39、40、45、46、51、52、57、58、63、64、69、70、75、76中任一序列所示；

所述预放大探针的序列SEQ ID No.5、6、11、12、17、18、23、24、29、30、35、36、41、42、47、48、53、54、59、60、65、66、71、72、77、78中任一序列所示。

2.根据权利要求1所述的探针用于制备检测宫颈癌致癌基因的试剂盒。

3.一种用于检测宫颈癌致癌基因的试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1所述的探针。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，还包括酶标记的放大探针、阳性校准品、阴性对照品、底物、底物催化剂、裂解液、缓冲液。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，还包括固定探针。

6.根据权利要求4所述酶标记的检测探针，其特征在于，所述酶标记的放大探针中的所述酶为碱性磷酸酶。

7.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述阳性校准品为高危亚型人乳头瘤病毒mRNA的同源性序列合成的DNA寡核苷酸。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述高危亚型人乳头瘤病毒为HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV56、HPV58、HPV59或HPV68。

9.一种用于非检测疾病用途的宫颈癌致癌基因的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：取不同浓度梯度的高危亚型人乳头瘤病毒的mRNA，通过捕获延伸探针、固定探针与固相载体连接，所述高危亚型人乳头瘤病毒的mRNA通过标记延伸探针与预放大探针连接后，所述预放大探针与酶标记的放大探针连接，获得标准复合物；取所述酶标记的放大探针中所述酶的底物及其底物催化剂与所述标准复合物混合，孵育，获得标准光强度，根据浓度与光强度的关系建立标准曲线；

步骤2：取宫颈上皮脱落细胞，经裂解获得待测样品的mRNA；

所述待测样品的mRNA通过捕获延伸探针、固定探针与固相载体连接；

所述待测样品的mRNA通过标记延伸探针与预放大探针连接后，所述预放大探针与酶标记的放大探针连接，获得待测复合物；

取所述酶标记的放大探针中所述酶的底物及其底物催化剂与所述待测复合物混合，孵育，获得待测光强度；

步骤3：根据所述待测光强度以及步骤1中所述标准曲线获得所述待测样品的浓度。

10.根据权利要求9所述的检测方法，其特征在于，所述孵育温度为53～56℃，孵育时间为3～4h。