[发明专利]一种用于眼表重建的羊膜脂质体及其制备方法和应用有效
申请号: | 201210562152.1 | 申请日: | 2012-12-21 |
公开(公告)号: | CN103006706A | 公开(公告)日: | 2013-04-03 |
发明(设计)人: | 杨洪滨;张小宇;寻延滨 | 申请(专利权)人: | 哈尔滨医科大学 |
主分类号: | A61K35/50 | 分类号: | A61K35/50;A61K9/127;A61P27/02 |
代理公司: | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人: | 孙皓晨 |
地址: | 150086 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 重建 羊膜 脂质体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种用于眼表重建的羊膜脂质体的制备方法,其特征在于是由磷脂,胆固醇,乙醚以及羊膜活性液按照以下步骤制备得到:
将磷脂和胆固醇的混合物置于圆底烧瓶中,用乙醚溶解,在旋转蒸发仪上减压蒸发除去乙醚,使在内壁上形成一薄膜,加入羊膜活性液,加玻璃珠数枚,振摇搅拌,使贴壁脂质膜完全溶脱,超声处理后,过滤灌封,即得。
2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述的羊膜活性液按照以下步骤制备得到:
取病原学检测无病毒性肝炎,艾滋病,梅毒等传染性疾病的剖宫产的新鲜胎盘,在整流罩无菌条件下,用含有25-75μg/ml青霉素钠、25-75μg/ml硫酸链霉素、50-150μg/ml硫酸新霉素和1.5-4.0μg/ml二性霉素B的生理盐水溶液冲洗胎盘数次,直至除去血迹,将胎盘浸于上述溶液中用医用钳从绒毛膜中钝性分离出羊膜;分离之后,用医用刀片将羊膜切成碎片,按重量体积比1:5-10加入浓度0.01mol/L,PH7.4PBS液,无菌条件下,研磨羊膜,匀浆机匀浆处理,用超声仪萃取多余的蛋白质;离心,取上清,加入维生素C及羟苯乙酯,混合即得。
3.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于所述的生理盐水溶液中含有50μg/ml青霉素钠、50μg/ml硫酸链霉素、100μg/ml硫酸新霉素和2.5μg/ml二性霉素B。
4.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于按重量体积比1:10加入PBS液。
5.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于所述的匀浆是以8000r/min匀浆2分钟;所述的超声萃取是强度10w,超声10分钟;所述的离心是以6500r/min离心10分钟。
6.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,加入维生素C及羟苯乙酯使其终浓度分别为0.5-2g/L及0.15-0.3g/L。
7.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述的磷脂是含磷脂酰胆碱不低于45%的蛋黄卵磷脂或大豆磷脂,胆固醇与磷脂的重量比为1:2-2.5,每100mg的胆固醇与磷脂的混合物用2-3ml乙醚溶解,羊膜活性液的用量为乙醚体积的3-5倍。
8.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述的超声是强度100w,超声5分钟;所述的过滤是无菌条件下0.2μm聚碳酸酯微孔滤膜挤压过滤2次。
9.由权利要求1-8任一项所述的方法制备得到的一种用于眼表重建的羊膜脂质体。
10.权利要求9所述的羊膜脂质体在制备用于眼表重建的药物中的应用。
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