[发明专利]三黄分散片的质量标准及其检测方法

权利要求书

1.一种三黄分散片的质量标准及其检测方法，其特征在于，包括利用高效液相色谱法对大黄总蒽醌、盐酸小檗碱、黄芩苷进行定性鉴别、土大黄苷的检查、溶出度的检查以及利用液相色谱法对大黄总蒽醌、盐酸小檗碱、黄芩苷进行含量测定。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述利用高效液相色谱法对大黄总蒽醌、盐酸小檗碱、黄芩苷进行定性鉴别包括如下步骤：照《中国药典》2010年版一部附录ⅥD收录的高效液相色谱法，在含量测定项下记录的色谱图中，供试品的芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、盐酸小檗碱、黄芩苷的主峰的保留时间均应与相应对照品的芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、盐酸小檗碱、黄芩苷的主峰的保留时间一致。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

【性状】：

薄膜衣片，除去包衣后显棕黄色；味苦；

【鉴别】：

照《中国药典》2010年版一部附录ⅥD收录的高效液相色谱法测定；

在含量测定项下记录的色谱图中，供试品的芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、盐酸小檗碱、黄芩苷的主峰的保留时间均应与相应对照品的芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、盐酸小檗碱、黄芩苷的主峰的保留时间一致；

【检查】：

（1）土大黄苷：

采用2010年版中国药典中三黄片的检查项收载的土大黄苷检查方法；

取土大黄苷对照品，加甲醇制成土大黄苷浓度为0.1-0.5mg/ml的溶液，作为土大黄苷对照品溶液；其他试剂均为分析纯；

取本品1片，研细，加甲醇20-40ml，功率120-200w及频率30-50KHz的条件下超声处理20-40min，放冷，过滤，滤液作为供试品溶液；

照《中国药典》2010年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验：吸取对照品溶液和供试品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸-水100:25-35:1.5-2.5:2.5-3.5为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的荧光斑点；

（2）溶出度：

取本品，照《中国药典》2010年版二部附录ⅩC第二法溶出度测定法，以0.3wt%-0.5wt%的十二烷基硫酸钠水溶液800-1000ml为溶出介质，转速为80-120转/min，依法操作，经30-60min时，取溶液5ml，滤过，取续滤液，照含量测定方法中测定黄芩苷的色谱条件，精密上样，随行黄芩苷对照品溶液，计算黄芩苷的溶出量，限度为标示量的70%，应符合规定；

（3）其他：

应符合《中国药典》2010年版二部附录I A片剂项下分散片下有关的各项规定；

【含量测定】：

（1）大黄总蒽醌：

照《中国药典》2010年版一部附录ⅥD高效液相色谱法测定；

①色谱条件与系统适应性试验：

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.1%磷酸溶液70-100:10-15为流动相；检测波长为254nm；理论板数按大黄素峰计算应不低于2000；

②对照品溶液的制备：

精密称取芦荟大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄素对照品、大黄酚对照品、大黄素甲醚对照品分别溶于甲醇，分别制成芦荟大黄素浓度为70-90μg/ml的芦荟大黄素对照品溶液、大黄酸浓度为70-90μg/ml的大黄酸对照品溶液、大黄素浓度为70-90μg/ml的大黄素对照品溶液、大黄酚浓度为70-90μg/ml的大黄酚对照品溶液、大黄素甲醚浓度为35-45μg/ml的大黄素甲醚对照品溶液；精密量取芦荟大黄素对照品溶液4ml、大黄酸对照品溶液10ml、大黄素对照品溶液3ml、大黄酚对照品溶液3ml、大黄素甲醚对照品溶液2ml共同加入到25ml容量瓶中，加甲醇补足25ml，得混合对照品溶液；混合对照品溶液中芦荟大黄素的浓度为11.2-14.4μg/ml、大黄酸的浓度为28-36μg/ml、大黄素的浓度为8.4-10.8μg/ml、大黄酚的浓度为8.4-10.8μg/ml、大黄素甲醚的浓度为2.8-3.6μg/ml；

③供试品溶液的制备：

取本品10片，精密称定，研细，过四号筛，精密称取80-120mg置于锥形瓶中，精密加95%乙醇40-60ml，密塞，称定重量，超声5-20min，放冷，用乙醇补足减失的重量，滤过，取续滤液，即得；

④分别精密吸取步骤②的对照品溶液与步骤③的供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本品每片含大黄总蒽醌以芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的总量计算，不得少于10.2mg；

（2）盐酸小檗碱：

照《中国药典》2010年版一部附录ⅥD高效液相色谱法测定；

①色谱条件与系统适应性试验：

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；每1000ml中加入磷酸二氢钾3.4g和十二烷基硫酸钠1.7g的乙腈-水0.8-1.2:0.8-1.2为流动相；检测波长为265nm；理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3000；

②对照品溶液的制备：

精密称取盐酸小檗碱对照品溶于甲醇，制成盐酸小檗碱浓度为0.05-0.15mg/ml的盐酸小檗碱对照品溶液，即得；

③供试品溶液的制备：

取本品10片，精密称定，研细，过四号筛，精密称取40-60mg置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇40-60ml，密塞，称定重量，功率120-200w及频率30-50KHz的条件下超声处理20-40min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

④分别精密吸取步骤②的对照品溶液与步骤③的供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

三黄分散片每片含盐酸小檗碱应为标示量的85%-115%；

（3）黄芩苷：

照《中国药典》2010年版一部附录ⅥD高效液相色谱法测定。

①色谱条件与系统适应性试验：

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸42-52:48-58:0.15-0.25为流动相；检测波长为280nm；理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000；

②对照品溶液的制备：

精密称取黄芩苷对照品溶于甲醇，制成黄芩苷浓度为0.04-0.10mg/ml的黄芩苷对照品溶液，即得；

③供试品溶液的制备：

取本品10片，精密称定，研细，过四号筛，精密称取40-60mg置于量瓶中，加70%乙醇15-25ml，功率120-200w及频率30-50KHz的条件下超声处理10-30min，放冷，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液5ml置25ml量瓶中，加70%乙醇补足25ml，即得；

④分别精密吸取步骤②的对照品溶液与步骤③的供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

三黄分散片每片含黄芩浸膏以黄芩苷计，应在51.0-69.0mg之间。