[发明专利]一种前列腺癌荧光定量PCR诊断试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测前列腺癌DD3^PCA3基因存在的荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于： 

由DNA提取液、PCR反应预混液、热启动Taq酶、阳性标准品和阴性质控品组成。 

所述的DNA是脱氧核糖核酸，所述的PCR是聚合酶链式反应，所述的Taq酶是一种耐热的DNA聚合酶。 

2.根据权利要求1所述的荧光定量PCR试剂盒，其特征是： 

PCR反应预混液包括PCR反应缓冲成分(200mM KCl，200mMTris-HCl，pH8.3，50mM(NH4)2SO4)，10mM的上游引物DD3-95F和10mM的下游引物DD3-521R，10mM荧光探针DD3-FAM，25mM MgCl2，2.5mM的dNTPs(dATP，dGTP，dCTP和dTTP等体积混合物)，1U的热启动Taq酶和无菌双蒸水； 

DD3-95F序列为：5′-GGTGGGAAGGACCTGATGATAC-3′， 

DD3-521R，序列为：5′-GGGCGAGGCTCATCGAT-3′， 

DD3-FAM序列为：5′-AGAAATGCCCGGCCGCCATC-3′，其中5′标记FAM基团，3′标记TAMARA基团。 

3.根据权利要求1所述的荧光定量PCR试剂盒，其特征是： 

阳性标准品是前列腺癌的特异性标志DD3基因中部分核酸片段连接到T载体上构建的质粒，核酸片段的序列为： 

GGTGGGAAGGACCTGATGATACAGAGGTGAGAAATAAGAAAGGCTGCTGACTTTACCATCTG AGGCCACACATCTGCTGAAATGGAGATAATTAACATCACTAGAAACAGCAAGATGACAATATAATGTCTAAGTAGTGACATGTTTTTGCACATTTCCAGCCCCTTTAAATATCCACACACACAGGAAGCACAAAAGGAAGCACAGAGATCCCTGGGAGAAATGCCCGGCCGCCATCTTGGGTCATCGATGAGCCTCGCCC。