[发明专利]光交联功能化的基因芯片及其制备方法及检测试剂盒

权利要求书

1.一种光交联功能化的基因芯片，其特征在于，包括支撑层、设置于所述支撑层上的引发剂层、共价结合于所述引发剂层上的聚寡聚乙二醇甲基丙烯酸甲酯层、连接于所述聚寡聚乙二醇甲基丙烯酸甲酯层侧链末端的光交联剂及固定于光交联剂上的DNA探针；所述DNA探针为

序列为SEQ ID NO:1的金黄色葡萄球菌探针、

序列为SEQ ID NO:2的大肠杆菌O157:H7探针、

序列为SEQ ID NO:3的副溶血弧菌探针、

序列为SEQ ID NO:4的志贺氏菌探针、

序列为SEQ ID NO:5的单胞李斯特菌探针、

序列为SEQ ID NO:6的腊样芽胞杆菌探针、

序列为SEQ ID NO:7的荚膜产气杆菌探针、

序列为SEQ ID NO:8的霍乱弧菌探针、

序列为SEQ ID NO:9的空肠弯曲菌探针、

序列为SEQ ID NO:10的沙门氏菌探针以及

序列为SEQ ID NO:11的小肠结肠炎耶尔森菌探针中的至少一种。

2.如权利要求1所述的光交联功能化的基因芯片，其特征在于，所述支撑物层为表面镀有金膜或银膜的玻璃基片。

3.如权利要求1所述的光交联功能化的基因芯片，其特征在于，所述引发剂层包括稀释剂和含聚乙二醇的引发剂，所述含聚乙二醇的引发剂与所述稀释剂的摩尔比为1:1000～5:100；其中，

所述稀释剂的结构式为：

所述含聚乙二醇的引发剂的结构式为：

4.如权利要求1所述的光交联功能化的基因芯片，其特征在于，所述聚寡聚乙二醇甲基丙烯酸甲酯层在干的状态下的厚度为5～20nm。

5.如权利要求1所述的光交联功能化的基因芯片，其特征在于，所述光交联剂为苯基叠氮类化合物、吖丙啶类化合物或二苯甲酮类化合物。

6.一种光交联功能化的基因芯片的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

利用自组装技术将引发剂自组装于支撑物层的表面上形成引发剂层；

将得到的表面覆盖有引发剂层的支撑物层浸泡在含单体的反应溶液中，并于保护气体氛围下反应，得到共价结合于引发剂层上的聚寡聚乙二醇甲基丙烯酸甲酯层，其中，所述含有单体的反应溶液由2-2’联吡啶、卤化亚铜、抗坏血酸、寡聚乙二醇甲基丙烯酸酯、甲基丙烯酸羟乙酯及体积比为1:1的甲醇水溶液配制而成，所述单体为寡聚乙二醇甲基丙烯酸酯和甲基丙烯酸羟乙酯；

在所述聚寡聚乙二醇甲基丙烯酸甲酯层的侧链末端引入光交联剂；

将DNA探针点样于光交联剂上，于室温下干燥后，在紫外光条件下进行交联固定DNA探针，得到所述光交联功能化的基因芯片，其中，所述DNA探针为序列为SEQ ID NO:1的金黄色葡萄球菌探针、序列为SEQ ID NO:2的大肠杆菌O157:H7探针、序列为SEQ ID NO:3的副溶血弧菌探针、序列为SEQ ID NO:4的志贺氏菌探针、序列为SEQ ID NO:5的单胞李斯特菌探针、序列为SEQ ID NO:6的腊样芽胞杆菌探针、序列为SEQ ID NO:7的荚膜产气杆菌探针、序列为SEQ ID NO:8的霍乱弧菌探针、序列为SEQ ID NO:9的空肠弯曲菌探针、序列为SEQ ID NO:10的沙门氏菌探针以及序列为SEQ ID NO:11的小肠结肠炎耶尔森菌探针中的至少一种。

7.如权利要求6所述的光交联功能化的基因芯片的制备方法，其特征在于，所述寡聚乙二醇甲基丙烯酸酯的结构式为：

其中，n为6、8、10或12。

8.如权利要求6所述的光交联功能化的基因芯片的制备方法，其特征在于，所述光交联剂为苯基叠氮类化合物、吖丙啶类化合物或二苯甲酮类化合物。

9.一种含权利要求1～5任一项所述的光交联功能化的基因芯片的检测试剂盒。

10.如权利要求9所述的检测试剂盒，其特征在于，还包括与检测试剂盒中的DNA探针对应的引物，其中：

与序列为SEQ ID NO:1的金黄色葡萄球菌探针对应的两条引物的序列为SEQ ID NO:12和SEQ ID NO:13；

与序列为SEQ ID NO:2的大肠杆菌O157:H7探针对应的两条引物的序列为SEQ ID NO:14和SEQ ID NO:15；

与序列为SEQ ID NO:3的副溶血弧菌探针对应的两条引物的序列为SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:17；

与序列为SEQ ID NO:4的志贺氏菌探针对应的两条引物的序列为SEQ ID NO:18和SEQ ID NO:19；

与序列为SEQ ID NO:5的单胞李斯特菌探针对应的两条引物的序列为SEQ ID NO:20和SEQ ID NO:21；

与序列为SEQ ID NO:6的腊样芽胞杆菌探针对应的两条引物的序列为SEQ ID NO:22和SEQ ID NO:23；

与序列为SEQ ID NO:7的荚膜产气杆菌探针对应的两条引物的序列为SEQ ID NO:24和SEQ ID NO:25；

与序列为SEQ ID NO:8的霍乱弧菌探针对应的两条引物的序列为SEQ ID NO:26和SEQ ID NO:27；

与序列为SEQ ID NO:9的空肠弯曲菌探针对应的两条引物的序列为SEQ ID NO:28和SEQ ID NO:29；

与序列为SEQ ID NO:10的沙门氏菌探针对应的两条引物的序列为SEQ ID NO:30和SEQ ID NO:31；

与序列为SEQ ID NO:11的小肠结肠炎耶尔森菌探针对应的两条引物的序列为SEQ ID NO:32和SEQ ID NO:33。