[发明专利]P16免疫细胞化学试剂盒及其制备用多肽序列

权利要求书

1.一种P16免疫细胞化学试剂盒，其特征在于：该试剂盒由第（1）-（6）号组分组成；其中：

第（1）号组分所含的第一抗体是三种小鼠抗人单克隆IgG抗体的混合物，三者浓度相同，按体积比1：1：1的比例混合；

第（2）号组分所含的第二抗体是偶联有辣根过氧化物酶的兔抗小鼠IgG多克隆抗体；

第（3）号组分所含的酶底物是二氨基联苯胺溶液；

第（4）号组分所含的阳性对照品是兔肾细胞RK13，经过慢病毒感染后，其基因组中整合有一段可表达的DNA序列D；由该序列转录翻译的产物为可以被上述三种单抗同时识别的多肽片段；

第（5）号组分所含的阴性对照品是不表达人P16蛋白的兔肾细胞RK13；

第（6）号组分所含的缓冲液为pH=7.4的磷酸缓冲液；

2.根据权利要求1所述的P16免疫细胞化学试剂盒，其特征在于：所述的构成第（1）号组分中的三个单克隆抗体分别由多肽A、B、C免疫小鼠，按常规单克隆抗体制备方法制备，并经过单次或多次筛选得到。

多肽A、B、C的具体序列信息如下：

多肽A（即：序列表中的SEQ ID NO.1）：MEPAAGSSMEPSADWAAAAAALPN

多肽B（即：序列表中的SEQ ID NO.2）：ARGRVEEVRALLEAGAAAAP

多肽C（即：序列表中的SEQ ID NO.3）：ALPNAPNSYGRRPIQVAAAAGSSME

上述多肽序列中，各单字母缩写的意义如下：G甘氨酸，A丙氨酸，V缬氨酸，L亮氨酸，I异亮氨酸，F苯丙氨酸，W色氨酸，Y酪氨酸，D天冬氨酸，H组氨酸，N天冬酰胺，E谷氨酸，K赖氨酸，Q谷氨酰胺，M甲硫氨酸，R精氨酸，S丝氨酸，T苏氨酸，C半胱氨酸，P脯氨酸。

3.根据权利要求1所述的P16免疫细胞化学试剂盒，其特征在于：在所述的第（4）号组分中，作为阳性对照品的RK13细胞基因组中含有一段可表达的序列D：

DNA序列D（即：序列表中的SEQ ID NO.4）的序列信息如下：

atggcgggga gcagcatgga gccttcggag gaggaggagg aggtgcgggc gctgctggag

gaggaggagg aggagaggcc gatccaggtc atgatgatgg gcgaggagga ggaggagccg

aatagttacg gtcggaagga ggaggaggag gaggtgcggg cgctgctgga ggaggaggag

gaggagccga atagttacgg tcggaagtga

在上述序列D中：a指腺嘌呤，t指胸腺嘧啶，g指鸟嘌呤，c指胞嘧啶。