[发明专利]用于细胞融合的淋巴细胞的制备方法

权利要求书

1.一种用于细胞融合的淋巴细胞的制备方法，用于单克隆抗体制备，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一、麻醉并固定小鼠；

步骤二、在第0天，用抗原对步骤一得到的小鼠的接近淋巴结的10个位点分别进行皮下注射，所述10个位点分别为颈背部的两个位点，腋窝、腹股沟、大腿和小腿的两侧并列位点，每个位点注射的抗原量为1.8~2.2μg；

步骤三、在第3天用所述抗原对步骤二得到的小鼠的所述10个位点的相近位点分别进行皮下注射，每个位点注射的抗原量为0.8~1.2μg；

步骤四、在第7天用所述抗原对步骤三得到的小鼠的后脚的两个足垫分别进行皮下注射，每个足垫注射的抗原量为19~21μg；

步骤五、在第12~14天，取步骤四得到的小鼠的淋巴结进行研磨，制成单细胞悬液，得到所述用于细胞融合的淋巴细胞。

2.根据权利要求1所述的用于细胞融合的淋巴细胞的制备方法，其特征在于，所述抗原为颗粒性抗原。

3.根据权利要求1所述的用于细胞融合的淋巴细胞的制备方法，其特征在于，所述抗原为用弗氏完全佐剂乳化的可溶性抗原。

4.根据权利要求1所述的用于细胞融合的淋巴细胞的制备方法，其特征在于，步骤一中，所述小鼠为6~8周龄的雌性BALB/C小鼠。

5.根据权利要求1所述的用于细胞融合的淋巴细胞的制备方法，其特征在于，步骤一中，所述麻醉小鼠的操作具体为用苯巴比妥钠对所述小鼠进行腹腔注射，剂量为100mg/kg。

6.根据权利要求1所述的用于细胞融合的淋巴细胞的制备方法，其特征在于，步骤五中，所述淋巴结为两侧腋窝淋巴结、前腿淋巴结、腹股沟淋巴结和后腿腘淋巴结中的至少一个。

7.根据权利要求1所述的用于细胞融合的淋巴细胞的制备方法，其特征在于，步骤五中，还包括检测小鼠血清效价在1：3200以上的操作。