[发明专利]一种高密度发酵生产谷胱甘肽的方法

权利要求书

1.一种高密度发酵生产谷胱甘肽的方法，其特征在于包括以巴斯德毕赤酵母（Pichia.pastoris SL1220）为发酵菌株，通过一级培养和二级培养后的二级种子接种于酵母培养基进行发酵培养，当发酵液OD达到100～200后，补加谷胱甘肽的前体氨基酸，控制发酵液中的碳源浓度在0.01～0.02mol/L，培养至48～64h为止。

2.根据权利要求1所述的高密度发酵生产谷胱甘肽的方法，其特征在于：所述的一级培养和二级培养是指从新鲜斜面上挑取巴斯德毕赤酵母（Pichia.pastoris SL1220）发酵菌株的菌体，接入装有50±5ml培养液的250ml摇瓶中，100±5rpm，32±2℃振荡培养10～12h；再以10%的接种量将一级种子接入二级种子培养液，控制pH值6.5±0.5，溶氧大于等于50%，32±2℃培养12～14h后得二级种子。

3.根据权利要求2所述高密度发酵生产谷胱甘肽的方法，其特征在于：二级种子接入到酵母培养基的接种量为0.5～5%。

4.根据权利要求3所述高密度发酵生产谷胱甘肽的方法，其特征在于：优选的接种量为1.5%。

5.根据权利要求3所述高密度发酵生产谷胱甘肽的方法，其特征在于：酵母培养基的碳源为葡萄糖、甲醇、糖蜜、麦芽汁、蔗糖中的至少一种，酵母培养基的氮源为酵母粉、酵母膏、蛋白胨、豆粕粉、氨水中的至少一种。

6.根据权利要求5所述高密度发酵生产谷胱甘肽的方法，其特征在于：酵母培养基的碳源优选的是糖蜜，酵母培养基的氮源优选的是蛋白胨。

7.根据权利要求3所述高密度发酵生产谷胱甘肽的方法，其特征在于：在酵母培养基中的发酵培养pH为5.0～8.0，发酵培养温度为25～32℃。

8.根据权利要求7所述高密度发酵生产谷胱甘肽的方法，其特征在于：在酵母培养基中的发酵培养pH为6.5，发酵培养温度为30℃。

9.根据权利要求3所述高密度发酵生产谷胱甘肽的方法，其特征在于：谷胱甘肽的前体氨基酸是L-谷氨酸、L-半胱氨酸、L-甘氨酸中的至少一种。

10.根据权利要求9所述高密度发酵生产谷胱甘肽的方法，其特征在于：谷胱甘肽的前体氨基酸是L-半胱氨酸。