[发明专利]DNA-壳聚糖复合纳米颗粒、其制备及应用无效
| 申请号： | 201210575641.0 | 申请日： | 2012-12-26 |
| 公开（公告）号： | CN103893754A | 公开（公告）日： | 2014-07-02 |
| 发明（设计）人： | 万晓春;田永帅;马轶凡;蔡林涛 | 申请（专利权）人： | 深圳先进技术研究院 |
| 主分类号： | A61K39/39 | 分类号： | A61K39/39;A61K47/36;A61K47/34;A61P37/02 |
| 代理公司： | 深圳市科进知识产权代理事务所(普通合伙) 44316 | 代理人： | 宋鹰武 |
| 地址： | 518055 广东省深圳*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | dna 聚糖 复合 纳米 颗粒 制备 应用 | ||
1.一种DNA-壳聚糖复合纳米颗粒，为壳聚糖增溶衍生物包裹的含有AS4短发夹序列的重组质粒，所述AS4短发夹序列为通过环状序列连接的SEQ NO.1所示序列与其互补序列。
2.根据权利要求1所述的纳米颗粒，其特征在于，所述壳聚糖增溶衍生物为壳聚糖-聚乙烯亚胺-聚乙二醇聚合物。
3.根据权利要求1所述的纳米颗粒，其特征在于，所述环状序列为TCAAGAG序列。
4.根据权利要求1所述的纳米颗粒，其特征在于，所述重组质粒的大小为4610bp。
5.根据权利要求1所述的纳米颗粒，其特征在于，所述纳米颗粒的粒径为35-50nm。
6.根据权利要求1所述的纳米颗粒，其特征在于，所述壳聚糖增溶衍生物与所述重组质粒的包被比例为摩尔比20:1。
7.用于制备权利要求1-6中任一项所述的纳米颗粒的方法，包括以下步骤：
S1合成AS4短发夹序列，并退火；
S2将经退火的AS4短发夹序列与双酶切线性质粒、DNA连接酶在连接缓冲液中混合，转化感受态大肠杆菌，接种于含氨苄抗性的LB培养基，做抗性筛查，选取抗性菌落，得到重组质粒溶液；以及
S3将壳聚糖增溶衍生物溶液与重组质粒溶液混合，得到DNA-壳聚糖复合纳米颗粒溶液。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，步骤S3中壳聚糖增溶衍生物溶液的pH为5.5。
9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，步骤S3中壳聚糖增溶衍生物溶液与重组质粒溶液在混合前，分别于65℃恒温5分钟。
10.权利要求1-6中任一项所述的纳米颗粒作为免疫佐剂的应用。
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