[发明专利]表达昆虫前胸腺激素基因的重组杆状病毒及其应用

权利要求书

1.表达昆虫促前胸腺激素基因的重组杆状病毒。

2.如权利要求1所述的重组杆状病毒，其特征在于：所述昆虫促前胸腺激素为如下（a）或（b）或（c）：

（a）由序列表中序列7所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

（b）由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

（c）将（a）或（b）经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有昆虫促前胸腺激素功能的蛋白质。

3.如权利要求2所述的重组杆状病毒，其特征在于：所述昆虫促前胸腺激素基因为如下1）或2）或3）或4）或5）的DNA分子：

1）序列表的序列6所示的DNA分子；

2）序列表的序列2自5’末端第30至710位核苷酸所示的DNA分子；

3）序列表的序列2所示的DNA分子；

4）在严格条件下与1）或2）或3）限定的DNA序列杂交且编码所述蛋白质的DNA分子；

5）与1）或2）或3）限定的DNA序列具有90%以上同源性且编码所述蛋白质的DNA分子。

4.如权利要求1至3中任一所述的重组杆状病毒，其特征在于：所述重组杆状病毒为权利要求5至8中任一所述方法制备得到的重组杆状病毒。

5.一种制备重组杆状病毒的方法，包括如下步骤：将重组杆状病毒质粒导入昆虫细胞并培养细胞，得到重组杆状病毒；所述重组杆状病毒质粒为具有昆虫促前胸腺激素基因的杆状病毒质粒；所述昆虫促前胸腺激素为如下（a）或（b）或（c）：

（a）由序列表中序列7所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

（b）由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

（c）将（a）（b）经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有昆虫促前胸腺激素功能的蛋白质。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述昆虫促前胸腺激素基因为如下1）或2）或3）或4）或5）的DNA分子：

1）序列表的序列6所示的DNA分子；

2）序列表的序列2自5’末端第30至710位核苷酸所示的DNA分子；

3）序列表的序列2所示的DNA分子；

4）在严格条件下与1）或2）或3）限定的DNA序列杂交且编码所述蛋白质的DNA分子；

5）与1）或2）或3）限定的DNA序列具有90%以上同源性且编码所述蛋白质的DNA分子。

7.如权利要求5或6所述的方法，其特征在于：所述重组杆状病毒质粒中，由op166启动子和/或P10启动子启动所述昆虫促前胸腺激素基因的表达。

8.如权利要求5或6或7所述的方法，其特征在于：所述重组杆状病毒质粒中具有表达盒甲和表达盒乙；所述表达盒甲为用于表达所述昆虫促前胸腺激素基因的表达盒；所述表达盒乙为用于表达杆状病毒多角体蛋白的编码基因的表达盒。

9.一种杀虫剂，其活性成分为如下物质中的至少一种：（Ⅰ）含有昆虫前胸腺激素基因的重组杆状病毒、重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌；（Ⅱ）昆虫前胸腺激素基因；（Ⅲ）昆虫前胸腺激素。

10.如下物质中的至少一种在制备杀虫剂中的应用：（Ⅰ）含有昆虫前胸腺激素基因的重组杆状病毒、重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌；（Ⅱ）昆虫前胸腺激素基因；（Ⅲ）昆虫前胸腺激素。