[发明专利]一种制备脑钠肽的方法及应用

权利要求书

1.一种制备脑钠肽的方法，其特征在于，该方法包括：

1)改造全基因合成人源化脑钠肽编码基因序列，去除大肠杆菌稀有密码子；

2)将步骤1)中改造后的脑钠肽编码基因序列插入表达载体中，并用大肠杆菌菌株转化表达；

3)将转化表达菌株接种于LB培养基，IPTG诱导；

4)所得菌体破菌，离心分离，过Ni-NTA柱纯化；

其中，步骤1)中改造后的全基因合成人源化脑钠肽编码基因序列为：

1   ATGGACCCGC AGACCGCTCC GTCTCGTGCT CTGCTGCTGC TGCTGTTCCT GCACCTGGCT

61  TTCCTGGGTG GTCGTTCTCA CCCGCTGGGT TCTCCGGGTT CTGCTTCTGA CCTGGAAACC

121 TCTGGTCTGC AGGAACAGCG TAACCACCTG CAGGGTAAAC TGTCTGAACT GCAGGTTGAA

181 CAGACCTCTC TGGAACCGCT GCAGGAATCT CCGCGTCCGA CCGGTGTTTG GAAATCTCGT

241 GAAGTTGCTA CCGAAGGTAT CCGTGGTCAC CGTAAAATGG TTCTGTACAC CCTGCGTGCT

301 CCGCGTTCTC CGAAAATGGT TCAGGGTTCT GGTTGCTTCG GTCGTAAAAT GGACCGTATC

361 TCTTCTTCTT CTGGTCTGGG TTGCAAAGTT CTGCGTCGTC ACTAG

2.如权利要求1所述制备脑钠肽的方法，其特征在于，步骤2)中所述表达载体为：pRSF Duet，pET表达系列。

3.如权利要求1所述制备脑钠肽的方法，其特征在于，步骤2)中所述大肠杆菌菌株为：BL21(DE3)，Rosetta(DE3)。

4.如权利要求3所述制备脑钠肽的方法，其特征在于，所述BL21(DE3)菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体的基因。

5.如权利要求4所述制备脑钠肽的方法，其特征在于，λ噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶，该区整合于BL21的染色体上形成所述BL21(DE3)。

6.如权利要求1所述制备脑钠肽的方法，其特征在于，步骤4)中所述破菌方法为高压破碎、超声或者溶菌酶酶解。

7.一种如权利要求1所述制备脑钠肽的方法在校准品、标准物质和参考品制备中的应用。

8.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述制备脑钠肽的纯品添加入人源或动物源的血清，配制成指定浓度的标准品或校准品

9.一种利用权利要求1所述制备脑钠肽的方法制成的产物作为免疫用的抗原物质，来筛选相关抗体。