[发明专利]D4去饱和酶和D5延伸酶有效
申请号: | 201210579165.X | 申请日: | 2007-10-31 |
公开(公告)号: | CN103074312A | 公开(公告)日: | 2013-05-01 |
发明(设计)人: | A·M·伯杰;G·S·吉鲁阿德;H·瑞迪亚宁塔斯 | 申请(专利权)人: | 加拿大海洋营养食品有限公司 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N15/54;C12N1/21;C12N1/19;C12N1/15;C12N5/10;A01K67/027;C12P7/64;C12R1/645 |
代理公司: | 北京北翔知识产权代理有限公司 11285 | 代理人: | 张广育;姜建成 |
地址: | 加拿大*** | 国省代码: | 加拿大;CA |
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摘要: | |||
搜索关键词: | d4 饱和 d5 延伸 | ||
本申请为分案申请,其原申请的申请日为2007年10月31日,申请号为200780100540.5(国际申请号为PCT/IB2007/004553),名称为“D4去饱和酶和D5延伸酶”。
I.背景
有压倒性的科学证据表明,(n-3)高级不饱和脂肪酸诸如二十二碳六烯酸(DHA)对心血管循环疾病、慢性炎症和脑功能障碍有积极作用。另一方面,已经注意到(n-6)脂肪酸诸如二十碳五烯酸(EPA)在类花生酸类固醇诸如前列腺素、白细胞三烯或类似的类花生酸类固醇中作为中间代谢产物。
目前,这些高级不饱和脂肪酸的主要来源是鱼,注意到EPA和DHA在各种海洋鱼类(blue fish)(诸如沙丁鱼和金枪鱼)中分别以大约20%和10%的量存在。认为这样一种脂肪酸谱是通过在每种鱼类中自然选择最佳表现的最佳比例而发生的。然而,如果人们想要使用鱼油作为这些脂质的唯一来源,还存在许多缺陷,诸如味道污染的问题,可获得性的不可控的波动,和天然鱼油成分的变化性。此外,如果人们想要从这些来源获得高度纯化的(n-3)或(n-6)油,很难优先分离并纯化它们。
此前公开了能够产生高量DHA和EPA以及其它首选脂肪酸的破囊壶菌目(Thraustochytriales)真核生物ONC-T18和相关有机体。ONC-T18公开在国际申请PCT/IB2006/003977和美国临时申请60/751401和60/821084,这些都通过参考至少涉及ONC-T18和其中产生的脂肪酸的信息的方式并入本文。期望操纵DHA和EPA途径。本文公开了来自ONC-T18、牵涉在这些途径中的两种酶D4去饱和酶和D5延伸酶的分离和表征。
II.概述
公开了涉及ONC-T18、D4-去饱和酶、D5延伸酶和分离、表征、产生、鉴定它们的方法和组合物,和它们用于脂肪酸产生的应用,以及包含这些组合物的有机体和表达这些组合物的有机体。
III.附图简述
并入本文并构成说明书一部分的附图,阐释了多种实施方式,并连同描述阐释了公开的组合物和方法。
图1显示EPA和DHA产生的途径。
图2A显示分离的D4去饱和酶的系统进化(phylogentic)树,图2B显示分离的D5-延伸酶的系统进化(phlogenetic)树。
图3显示分离的D4去饱和酶的图示遗传概述。
图4显示分离的D5延伸酶的图示遗传概述。
IV.详述
公开和描述本发明的化合物、组合物、物品、装置和/或方法之前,应理解的是,除非另外指明,否则它们不限于具体合成方法或具体重组生物技术方法,或除非另外指明,否则不限于具体试剂,因为本发明的这些化合物、组合物、物品、装置和/或方法当然都可以变化。还应理解的是,本文所用的术语仅是为了描述具体实施方案的目的,不意为限制。
A.定义
在说明书和所附的权利要求书中所用的,除非上下文另外清楚地指明,否则单数形式“一个”、“一种”和“该”包括多数指示物。因此,例如,提到“一种药物运载体”包括两种或多种所述运载体(carrier)的混合物,等等。
本文中范围可表示为从“约”一个具体值和/或到“约”另一个具体值。当表示这种范围时,另一实施方案包括从一个具体值和/或到另一个具体值。类似地,当数值通过使用先行词“约”表示为近似值时,应理解的是,该具体值形成另一实施方案。进一步应理解的是,每个范围的端点在相对于另一端点和独立于另一端点两种情况下都是有意义的。还应理解的是,本文公开了许多数值,每个数值除了该数值本身,还在本文公开为“约”该具体值。例如,如果公开数值“10”,那么还公开了“约10”。还应理解的是,当公开数值时,还公开了“小于或等于”该数值、“大于或等于该数值”和数值之间的可能范围,如本领域技术人员适当地理解的。例如,如果公开“10”,则还公开了“小于或等于10”以及“大于或等于10”。还应理解的是,在本申请中,数据以多种不同形式提供,且该数据代表端点和起点,以及数据点的任何组合的范围。例如,如果公开具体数据点“10”和具体数据点15,则应理解的是,认为公开了大于、大于或等于、小于、小于或等于、等于10和15以及10与15之间。还应理解的是,还公开了两个具体单位之间的每个单位。例如,如果公开10和15,那么还公开了11、12、13和14。
在说明书和所附的权利要求书中,将提及许多术语,这些术语应被界定为具有以下含义:
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