[发明专利]一种人星状病毒核苷酸的检测引物和探针及检测方法

权利要求书

1.一种人星状病毒核苷酸的检测引物，其特征在于：所述的检测引物由正向引物和反向引物组成，其核苷酸序列如下：

正向引物：5’-GCCAGACTCACAGAAGAGCAAC-3’；

反向引物：5’-GGACTTGCTAGCCATCACACTTC-3’。

2.与权利要求1所述的检测引物配合使用的探针，其特征在于：所述探针的核苷酸序列如下：：5’-CCTCCCCTCCAAATGCGATGGAG-3’；该探针的5’端标记有报告荧光染料，3’端标记有淬灭荧光染料。

3.根据权利要求2所述的探针，其特征在于：所述探针的5’端标记有报告荧光染料，3’端标记有淬灭荧光染料。

4.根据权利要求2所述的探针，其特征在于：

所述的报告荧光染料优选为Fam、Hex、Tet、Joe、Vic、FITC、Cy3或Cy5；

所述的淬灭荧光染料优选为Tamra、Rox、Dabcy1、BHQ1或BHQ2。

5.一种检测人星状病毒核苷酸的方法，其特征在于包括如下步骤：以待检样品RNA为模板，利用上述的正向引物、反向引物以及探针进行实时荧光RT-PCR扩增，每个循环结束采集数据，反应结束后根据扩增曲线判定结果。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述的实时荧光RT-PCR反应体系包括如下组分：2.5μL10×One Step RNA PCR Buffer，2μL dNTP（各2.5mM），上述正向引物和反向引物（10μM）各1.5μL，0.5μL上述探针（10μM），0.5μLTaq酶，0.5μLRNase Inhibitor（40U/μL），0.5μL AMV RTase XL（5U/μL），5μL RNA，10.5μL RNase Free dH₂O。