[发明专利]来源于极端嗜酸菌的泛应急蛋白FaUSPA基因、表达载体及其构建和应用有效
| 申请号： | 201210585227.8 | 申请日： | 2012-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN103898126A | 公开（公告）日： | 2014-07-02 |
| 发明（设计）人： | 彭日荷;姚泉洪;田永生;赵伟;付晓燕;朱波;许晶;高建杰;韩红娟;王波;王丽娟;韩静;薛永 | 申请（专利权）人： | 上海市农业科学院 |
| 主分类号： | C12N15/31 | 分类号： | C12N15/31;C12N15/74;C12N1/21;C12R1/145 |
| 代理公司： | 上海开祺知识产权代理有限公司 31114 | 代理人： | 费开逵 |
| 地址： | 201106 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 来源于 极端 嗜酸菌 应急 蛋白 fauspa 基因 表达 载体 及其 构建 应用 | ||
1.一种来源于极端嗜酸菌Ferroplasma acidarmanus的泛应急蛋白FaUSPA基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO1所示。
2.包含权利要求1所述的来源于来极端嗜酸菌的泛应急蛋白FaUSPA基因的大肠杆菌-梭菌穿梭表达载体。
3.根据权利要求2所述的大肠杆菌-梭菌穿梭表达载体，其特征在于，所述表达载体是以pSOS94载体为基础载体，将氯霉素抗性基因表达单元，梭菌CAC3645基因启动子、权利要求1所述的FaUSPA基因的阅读框表达单元和枯草杆菌pyruvate kinase基因终止子定向连接后替换pSOS94载体中的ctfAB及abc表达单元构建而成的。
4.根据权利要求3所述的大肠杆菌-梭菌穿梭表达载体，其特征在于，从pXYP251载体中扩增氯霉素表达单元，引物为cm1:5’-AAGCTTATAACTTCGTATAATGTATGCTATACGAAG-3’，cm2:5’-TCTAGATATACGAAGATAACTTCGTATAGCATACAT-3’；扩增条件为94℃30s，60℃30s，72℃60s；25循环。
5.根据权利要求3所述的大肠杆菌-梭菌穿梭表达载体，其特征在于，从梭菌C.acetobutylicum ATCC824中扩增CAC3645基因启动子，引物为c3645z:5’-TCTAGATAACCTGTAAAAAGATGATGG-3’，c3645f:5’-GGATCCCTTGTTTCTCCTCTCACTTGA-3’。扩增条件为94℃30s，60℃30s，72℃30s；25循环。
6.根据权利要求3或5所述的大肠杆菌-梭菌穿梭表达载体，其特征在于，所述梭菌CAC3645基因启动子的碱基序列如SEQ ID NO2所示。
7.根据权利要求3所述的大肠杆菌-梭菌穿梭表达载体，其特征在于，从枯草杆菌Bacillus subtilis168中扩增PYK基因终止子，引物为pyk1:5’-GAGCTCTTACAGGTGAAAATGGAAGGGGA-3’，pyk2:5’-CATATGTATAGCGGGTAACCCAACGGGATAAGAAGACAGGCGCCG-3’；扩增条件为94℃30s，60℃30s，72℃30s；25循环。
8.权利要求1所述的来源于来极端嗜酸菌Ferroplasma acidarmanus的泛应急蛋白FaUSPA基因在提高梭菌丁醇耐受性中的应用。
9.权利要求1所述的来源于来极端嗜酸菌Ferroplasma acidarmanus的泛应急蛋白FaUSPA基因在提高梭菌丁醇产量中的应用。
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