[发明专利]一种氨基脲(SEM)衍生化试剂及其使用方法有效
申请号: | 201210586467.X | 申请日: | 2012-12-31 |
公开(公告)号: | CN103105488A | 公开(公告)日: | 2013-05-15 |
发明(设计)人: | 戴信敏 | 申请(专利权)人: | 戴信敏 |
主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543 |
代理公司: | 北京北翔知识产权代理有限公司 11285 | 代理人: | 宁涛;张广育 |
地址: | 351200 福建*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 氨基 sem 衍生 试剂 及其 使用方法 | ||
1.一种氨基脲衍生化试剂,其特征在于所述的氨基脲衍生化试剂为带有特异性小分子标记的醛基苯甲酸,所述醛基苯甲酸能通过醛基与氨基脲的氨基反应,形成带有特异性小分子标记的氨基脲-醛基苯甲酸衍生物。
2.根据权利要求1所述的氨基脲衍生化试剂,其特征在于所述的特异性小分子标记是能够与特异性蛋白或抗体结合的小分子,包括生物素、地高辛、组氨酸、荧光分子,所述荧光分子包括CY-5、CY-3、FITC、FAM。
3.根据权利要求1或2所述的氨基脲衍生化试剂,其特征在于所述的特异性小分子标记通过一段短臂连接在醛基苯甲酸的羧基上,短臂为任选地掺杂N或O或S或P的2-30个C的直链分子。
4.根据权利要求1或2所述的氨基脲衍生化试剂,其特征在于所述醛基苯甲酸为对醛基苯酸衍生物或邻醛基苯甲酸。
5.一种检测样品中氨基脲方法,包括:
(1)用抗氨基脲-醛基苯甲酸衍生物抗体包被酶标板;
(2)使样品与带有特异性小分子标记的醛基苯甲酸接触,形成带有特异性小分子标记的氨基脲-醛基苯甲酸衍生物;
(3)将步骤(2)得到的混合物加入步骤(1)的酶标板中,使所述带有特异性小分子标记的氨基脲-醛基苯甲酸衍生物固定在酶标板上;
(4)再向所述酶标板中加入能与所述特异性小分子标记结合的酶标二抗,使其与所述特异性小分子标记反应;
(5)对步骤(4)中发生的反应进行检测,根据标准曲线计算氨基脲的含量。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于所述的氨基脲衍生化试剂被溶解于极性溶剂中,所述极性溶剂选自甲醇、水、乙醇、DMSO、DMF及其混合物。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于所述的酶标板采用96孔酶标板,并封闭板上未包被抗体的空白孔。
8.根据权利要求5所述的方法,其特征在于所述抗氨基脲-醛基苯甲酸衍生物抗体为鼠单抗、兔多抗及基因工程抗体中的任意一种。
9.根据权利要求5所述的方法,其特征在于所述的酶标二抗为辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记的、能与所述特异性小分子标记结合的蛋白或抗体及其偶联物,所述蛋白或抗体及其偶联物选自亲和素/链霉亲和素、地高辛抗体、组氨酸抗体/含Ni亲和分子、荧光分子抗体。
10.根据权利要求5所述的方法,其特征在于所述检测是用酶标仪测量吸光度。
11.一种检测样品中氨基脲的试剂盒,其特征在于包括:
(1)带有特异性小分子标记的醛基苯甲酸;
(2)包被有抗氨基脲-醛基苯甲酸衍生物抗体的酶标板;
(3)酶标二抗。
12.根据权利要求11所述的试剂盒,其特征在于所述的特异性小分子标记是能够与特异性蛋白或抗体结合的小分子,包括生物素、地高辛、组氨酸、荧光分子,所述荧光分子包括CY-5、CY-3、FITC、FAM。
13.根据权利要求12所述的试剂盒,其特征在于所述的特异性小分子标记通过一段短臂连接在醛基苯甲酸的羧基上,短臂为任选地掺杂N或O或S或P的2-30个C的直链分子。
14.根据权利要求11所述的试剂盒,其特征在于所述抗氨基脲-醛基苯甲酸衍生物抗体为鼠单抗、兔多抗及基因工程抗体中的任意一种。
15.根据权利要求11所述的试剂盒,其特征在于所述的酶标二抗为辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记的、能与所述特异性小分子标记结合的蛋白或抗体及其偶联物,所述蛋白或抗体及其偶联物选自亲和素/链霉亲和素、地高辛抗体、组氨酸抗体/含Ni亲和分子、荧光分子抗体。
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