[发明专利]抗牛乳房炎耐药菌IgY与复合噬菌体组合物及其制备方法及制剂

说明书

本发明涉及一种抗牛乳房炎耐药菌IgY与复合噬菌体组合物、其制备方法、以及其制剂。该方法包括以下步骤：1)筛选引致牛乳房炎的代表性耐药致病菌作为病原体；2)培养有代表性的牛乳房炎耐药致病菌；3)应用抗体技术制备高活性抗牛乳房炎耐药菌IgY；4)制备牛乳房炎有代表性耐药致病宿主细菌的复合噬菌体；5)制备抗牛乳房炎耐药菌IgY和复合噬菌体的组合物；6)制备含抗牛乳房炎耐药菌IgY和复合噬菌体组合物的针剂和乳房灌注剂以及膏剂等制剂。本发明结合了抗牛乳房炎耐药菌IgY和噬菌体各自的优势，克服了IgY不能直接杀灭致病菌的不足，同时充分发挥噬菌体小剂量给药可达到大剂量效果的增效作用；从而提升了产品对顽固性牛乳房炎和隐性乳房炎的疗效。

技术领域

本发明涉及牛乳房炎的治疗药物，尤其涉及到一种抗牛乳房炎耐药菌IgY与复合噬菌体组合物、其制备方法、以及这种组合物制剂。

背景技术

奶牛乳房炎是世界范围内最常见而又最难防治的奶牛疾病之一。目前全世界约有2.2亿头奶牛，其中1/3患有各种类型的乳房炎。据统计，临床型乳房炎占奶牛总发病的2成多，一般造成产奶量下降，乳液废弃，严重时，患牛乳区肿胀硬化、化脓、坏疽甚至萎缩，失去泌乳能力，被迫淘汰，每年因乳房炎而最终淘汰的病牛约占总淘汰率的30%。而在所有的牛乳房炎中，隐性乳房炎在奶牛群中最普遍，在一个牛群中，大多数乳房炎（大约90%）是隐性型，给奶农造成的经济损失也最大。残酷的现实是，即使在饲养水平较高的发达国家，隐性乳房炎的发病率也在50%以上，而且至今仍无真正有效的防治手段和方法；因此，严重阻碍了世界各国以及我国的乳牛业的发展。

目前，全球对奶牛乳房炎普遍采用抗生素进行治疗。但是，使用抗生素治疗一方面会造成牛乳中抗生素残留，另一方面会诱发细菌产生耐药性，使抗生素失效，造成慢性乳房炎特别是隐性乳房炎比例越来越来大。特别是大量使用抗生素之后形成的L-型变种耐药致病菌，目前所有抗生素对它都无效；既使施用再多抗生素，它仍会隐藏在乳房内生存和繁殖，慢性感染乳腺，使乳房炎反复发作。另外，抗生素会杀灭有益菌，从而影响乳房内正常菌群平衡，破坏机体天然免疫屏障，给有害菌大开方便之门。这些都是造成牛乳房炎无法根治，并且不断蔓延的根本原因。

因此，研发一种既能有效防治临床型牛乳房炎，又能防治迄今仍束手无策的隐性牛乳房炎的新方法，解决严重影响乳业发展的最大难题，以达到提高乳制品质量和增加养殖经济效益的双重目的，是目前全球奶牛饲养业的迫切需求。

发明内容

本发明要解决的技术问题在于，针对现有牛乳房炎的治疗药物无法有效杀死病菌的缺陷，提供一种抗牛乳房炎耐药菌IgY与复合噬菌体组合物及其制备方法以其制剂。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：构造一种抗牛乳房炎耐药菌IgY与复合噬菌体组合物的制备方法，包括以下步骤：

S1、筛选引致牛乳房炎的代表性耐药致病菌作为病原体，所述耐药致病菌为耐药金黄色葡萄球菌、耐药停乳链球菌、耐药无乳链球菌以及耐药大肠杆菌中的一种或多种；

S2、将所述耐药致病菌粉碎处理后，加入福氏佐剂，再高速匀化处理形成油包水乳液，即制得耐药致病菌复合抗原；

S3、采用所述耐药致病菌复合抗原对具有高免疫应答能力的选择产蛋禽类进行免疫，再拣取所产的免疫蛋；

S4、对所述免疫蛋进行消毒，取蛋黄，制得抗牛乳房炎耐药致病菌特异性IgY；

S5、制备引致牛乳房炎的代表性耐药致病菌的复合噬菌体，包括耐药致病菌为耐药金黄色葡萄球菌噬菌体、耐药停乳链球菌噬菌体、耐药无乳链球菌噬菌体以及耐药大肠杆菌噬菌体；

S6、将所制得的抗牛乳房炎耐药菌特异性IgY和复合噬菌体混合，制得抗牛乳房炎耐药菌特异性IgY与复合噬菌体组合物。

在根据本发明所述的抗牛乳房炎耐药菌IgY与复合噬菌体组合物的制备方法中，所述步骤S5进一步包括：