[发明专利]热稳定性高的果糖赖氨酸氧化酶及其制备方法有效
| 申请号： | 201210588026.3 | 申请日： | 2012-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN103122338A | 公开（公告）日： | 2013-05-29 |
| 发明（设计）人： | 邹炳德;邹继华;贾江花;汪屹 | 申请（专利权）人： | 宁波美康生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/06 | 分类号： | C12N9/06;C12N15/53;C12R1/19;C12R1/66 |
| 代理公司： | 宁波市鄞州甬致专利代理事务所(普通合伙) 33228 | 代理人： | 代忠炯 |
| 地址： | 315104 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 热稳定性 果糖 赖氨酸 氧化酶 及其 制备 方法 | ||
1. 一种热稳定性高的果糖赖氨酸氧化酶，其特征在于： 其氨基酸序列为SEQ ID.No.2所示序列。
2. 一种编码权利要求1所述的热稳定性高的果糖赖氨酸氧化酶的多核苷酸，其特征在于：其核苷酸序列为SEQ ID.No.1所示序列。
3. 一种热稳定性高的果糖赖氨酸氧化酶的制备方法，其特征在于：它包括以下步骤：
1) 菌体的获得：培养含有重组质粒的大肠杆菌菌种，加入IPTG诱导2-8小时，离心收集菌体，收集的菌体用缓冲液重新悬浮，超声破碎，离心收集上清；
2) 硫酸铵沉淀：使用硫酸铵溶液对步骤1)所得上清液进行分级沉淀，将最后收集得到的沉淀溶于buffer A中，得到粗提液；
3) 亲和层析：用buffer A平衡镍柱，再将步骤2)得到的粗提液上镍柱吸附，吸附结束后，用咪唑溶液进行梯度洗脱，收集洗脱液；
4) 透析：将步骤3)中的洗脱液装至透析袋中，置于4℃透析液中，并磁力搅拌透析12-24小时，即得到热稳定性高的果糖赖氨酸氧化酶。
4. 根据权利要求3所述的一种热稳定性高的果糖赖氨酸氧化酶的制备方法，其特征在于：所述buffer A的组成为：磷酸钾缓冲液10-100 mM，pH 8.0， NaCl 100-1000mM。
5. 根据权利要求3所述的一种热稳定性高的果糖赖氨酸氧化酶的制备方法，其特征在于：所述咪唑溶液的组成为：磷酸钾缓冲液10-100 mM，pH 8.0， NaCl 100-1000mM，咪唑 20mM-1000mM。
6. 根据权利要求3所述的一种热稳定性高的果糖赖氨酸氧化酶的制备方法，其特征在于：所述透析液的组成为：磷酸钾缓冲液10-100 mM，pH 8.0，NaCl 100-1000mM。
7. 根据权利要求3所述的一种热稳定性高的果糖赖氨酸氧化酶的制备方法，其特征在于：所述重组质粒通过将基因FAOD-MK18连接至pET-22b载体上获得。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于宁波美康生物科技股份有限公司，未经宁波美康生物科技股份有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201210588026.3/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
