[发明专利]一种具有降血糖功能制剂的质量控制方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种具降血糖功能制剂的检测方法，特别是指一种以L-阿拉伯糖与壳寡糖为主要原料制成的复方制剂检测方法，属于对食品或保健食品进行质量控制的技术领域。

背景技术

一种具有降血糖功能制剂是本申请人研制的一种由以L-阿拉伯糖与壳寡糖为主要原料制成的复方制剂，参见本申请人于2012-09-10申请的申请号为201210333553X名称为一种具有辅助降血糖功能的组合物及其制品的专利申请，壳寡糖是由2-20个D-氨基葡萄糖通过β-1,4糖苷键组成的水溶性低聚糖，是壳聚糖经化学或酶降解后的产物，L-阿拉伯糖为戊醛单糖，通常与其他单糖结合，以杂多糖形式广泛地存在于植物中。临床实验证明，两者均有降血糖作用，将壳寡糖与L-阿拉伯糖进行联合服用具有协同作用，通过结合壳寡糖的促进人体胰岛素分泌、增加胰岛受体敏感性作用，与L-阿拉伯糖抑制蔗糖降解、降低葡萄糖吸收作用相结合，起到双向调节作用，可有效地将血糖值控制在人体正常范围内。

质量标准对产品安全稳定、质量可控有着重要的意义，本品为复方制剂，对产品中功效成分进行定性或定量测定，将提高产品质量的可控度，保证产品疗效。鉴于目前尚无制剂中壳寡糖鉴别方法、L-阿拉伯糖含量测定方法，本发明将首次建立制剂中壳寡糖鉴别方法及L-阿拉伯糖含量测定方法。

发明内容

本发明所述的一种含有L-阿拉伯糖与壳寡糖、具降血糖功能制剂的质量控制方法，包括性状、检查、鉴别和含量测定，其中鉴别将采用化学显色法和薄层色谱法对制剂中壳寡糖进行鉴别，含量测定采用高效液相色谱法对衍生化的L-阿拉伯糖进行检测。

经文献查询及实验研究发现，本品原料壳寡糖为多糖类成分，无法提供标准品，故无法进行含量测定，但其分子结构中有特征性的游离氨基，因而可以对水解后产生的特有氨基葡萄糖进行Elson－Morgan法鉴别及薄层鉴别，专属性强。

L-阿拉伯糖可以采用高效液相法进行含量测定，但采用高效液相-示差检测器、高效液相-蒸发光检测器法进行测定时，多糖壳寡糖对L-阿拉伯糖的测定存在严重干扰，而采用柱前衍生-高效液相-紫外分光光度计进行测定时，可以有效的降低含量测定的干扰。

一种具有降血糖功能制剂的质量控制方法，该制剂以L-阿拉伯糖与壳寡糖为主要原料提取制成，分别对L-阿拉伯糖与壳寡糖进行定量测定和定性鉴别，其中，

对L-阿拉伯糖的定量测定方法如下：向待测试样中加入氢氧化钠溶液和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮的甲醇溶液进行衍生化反应，反应结束后加入适量盐酸中和，滤膜过滤后进行高效液相色谱测定；

对壳寡糖的定性鉴别采用化学显色鉴别或薄层色谱鉴别。

所述高效液相色谱测定的色谱条件为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，0.1-0.2mol/L pH5.0-6.0醋酸铵缓冲溶液-乙腈为流动相，醋酸铵缓冲溶液-乙腈的体积比为80-70：20：30，检测波长为244-252nm。

所述反应样品溶液中L-阿拉伯糖浓度为0.0133mol/L时，氢氧化钠溶液的浓度为0.07-0.15mol/L，1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮的甲醇溶液浓度为0.2-0.4mol/L，即控制氢氧化钠、1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮和L-阿拉伯糖三者的摩尔比为5.22-11.18：11.21-22.43：1。

所述衍生化反应条件为：60-80℃水浴中反应至少30min，每10-20min振摇一次。

所述化学显色鉴别方法为根据壳寡糖酸性条件下与乙酰丙酮缩合形成生色原2-甲基-3-二乙酰吡咯衍生物，生色原再与对-二甲基苯甲醛在浓盐酸甲醇溶液中发生络合反应，生成紫色溶液，从而进行鉴别。

所述薄层色谱鉴别方法是以盐酸水解后的壳寡糖为供试品，盐酸氨基葡萄糖为对照品，以体积比7-9:3-1的甲醇：氨水为展开剂，茚三酮试液为显色剂的薄层色谱鉴别方法。

本发明建立的一种具有降血糖功能制剂的质量控制方法，根据壳寡糖分子中特征氨基基团进行化学显色法鉴别，或以盐酸氨基葡萄糖为对照品对水解后的壳寡糖进行薄层鉴别，对制剂中L-阿拉伯糖采用衍生化后，采用高效液相色谱-紫外光谱法进行测定，可实现对具有降血糖功能制剂的良好质量控制。

附图说明

附图1为本发明的化学显色鉴别试验图谱，其中1为空白溶剂，2为阴性空白，3为对照品溶液，4为供试品溶液(批号：20120501)，5为供试品溶液(批号：20120502)，6为供试品溶液(批号：20120503)；