[发明专利]培养基组合物和培养基及对菌株进行活菌计数的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种培养基组合物和含有该培养基组合物的培养基，以及利用该培养基对菌株进行活菌计数的方法。

背景技术

葡萄酒酿造是一个复杂的微生物学过程，其中酵母菌是占主导地位的微生物。葡萄酒的酒精发酵主要是在酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）的作用下，采用自然发酵、纯种发酵或混合发酵，将葡萄汁中的营养成分转化成酒精和其他风味物质的过程。

在葡萄酒酿造过程中，经常采用单一酿酒酵母菌株进行酒精发酵，但是近年来的研究充分表明，不同的酿酒酵母菌株所酿的葡萄酒在风格、品质及色、香和味上均有很大差异，也有越来越多的研究采用不同的酿酒酵母菌株对葡萄酒进行双菌株混合发酵，以期提高葡萄酒的品质或改良产品风味。在这种混合发酵过程中，为研究酿酒酵母不同菌株之间在数量上的演替关系，就需要在同一葡萄酒发酵体系中对酿酒酵母不同菌株进行活菌计数。但是，长期以来酵母菌的检测通常使用YEPD培养基、马铃薯培养基、麦芽汁培养基、察氏培养基等，这些培养基上生长的酵母菌往往形态极为相似，尤其是在对酿酒酵母进行检测时，很难对酿酒酵母不同菌株进行准确计数。WL培养基是一种用于酵母菌和细菌计数的培养基，该培养基可以用来检测并判别一些不同属种的酵母菌株，但是对于同一属种的酿酒酵母，即使是不同来源，也不能在一块培养平板上以菌落形态的不同加以区分。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术提供的培养基难以实现对酿酒酵母不同菌株同时进行活菌计数的缺陷，提供一种可以对菌株进行活菌计数的培养基组合物、培养基及活菌计数方法。

本发明的发明人发现，在所有的氮源中铵离子是最容易被酿酒酵母利用的氮源，而尿素以及氨基酸，特别是脯氨酸、尿素、亮氨酸、异亮氨酸、精氨酸、甘氨酸等，是酿酒酵母较难利用的氮源。当培养基中存在铵离子时，酿酒酵母优先利用铵离子；当培养基中铵离子的量受限或被消耗殆尽时，不同酿酒酵母菌株利用尿素以及脯氨酸等氨基酸较难利用的氮源的能力有着显著的差异，在培养基上生长时会显示出不同的生长速度，致使菌落直径大小出现差异，因此在培养基上容易辨别。

基于以上发现，本发明提供了一种培养基组合物，该培养基组合物含有氮源，其中，所述氮源含有尿素和/或氨基酸，以氮元素计,尿素和/或氨基酸占氮源总含量的80重量%以上，以培养基组合物的总重量为基准，以氮元素计，所述氮源的总含量为0.02-15重量%。

优选地，以氮元素计,尿素和/或氨基酸占氮源总含量的90重量%以上。

优选地，以培养基组合物的总重量为基准，以氮元素计，所述氮源的总含量为0.5-8重量%。

另一方面，本发明提供了一种培养基，该培养基含有一种培养基组合和水，其中，所述培养基组合物为本发明提供的培养基组合物，所述培养基组合物与水的重量比为1:20-30。

再一方面，本发明提供了一种对菌株进行活菌计数的方法，该方法包括：将菌株在培养基上进行平板培养，对培养后的菌株进行平板计数，其中，所述培养基为本发明提供的培养基。

由实施例和对比例可以看出，通过在培养基中添加酿酒酵母难以利用的氮源，并控制氮源的含量，优选的情况下，在培养基中还添加铋盐和亚硫酸盐，使得在该培养基中生长的酿酒酵母的不同菌株可以形成形态和颜色不同的菌落，从而可以区分酿酒酵母不同的菌株，因此，实现了对不同酿酒酵母菌株共同进行活菌计数的目的。

本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。

附图说明

附图是用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具体实施方式一起用于解释本发明，但并不构成对本发明的限制。在附图中：

图1显示了培养72小时后不同酿酒酵母菌株（CGMCC3284菌株和F15菌株）在培养基上的菌落直径和颜色；其中，CGMCC3284指酿酒酵母CGMCC3284菌株，F15指酿酒酵母F15菌株。

具体实施方式

以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。

一方面，本发明提供了一种培养基组合物，该培养基组合物含有氮源，其中，所述氮源含有尿素和/或氨基酸，以氮元素计,尿素和/或氨基酸占氮源总含量的80重量%以上，以培养基组合物的总重量为基准，以氮元素计，所述氮源的总含量为0.02-15重量%。