[发明专利]生物样本的预处理方法、RNA的检测方法及预处理试剂盒有效
申请号: | 201280001834.3 | 申请日: | 2012-06-28 |
公开(公告)号: | CN103097531B | 公开(公告)日: | 2016-11-23 |
发明(设计)人: | 林崎良英;臼井健悟;合田砂织;野村和仁;川井雄辉 | 申请(专利权)人: | 达纳福股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C07K14/79;C12N9/36;C12N9/99 |
代理公司: | 北京北翔知识产权代理有限公司 11285 | 代理人: | 钟守期;苏萌 |
地址: | 日本神奈*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 生物 样本 预处理 方法 rna 检测 试剂盒 | ||
1.生物样本的预处理方法,其是包含RNA的生物样本的预处理方法,其特征在于:
所述生物样本包含乳铁蛋白(Lactferrin),
对所述生物样本实施乳铁蛋白的RNA分解活性抑制处理。
2.权利要求1的生物样本的预处理方法,其特征在于:通过在所述生物样本中添加乳铁蛋白的RNA分解活性抑制剂,来对所述生物样本实施乳铁蛋白的RNA分解活性抑制处理。
3.权利要求1或2的生物样本的预处理方法,其特征在于:所述生物样本包括:动物的鼻粘膜、鼻窦黏膜、气管粘膜、唾液、来自口腔或咽喉的分泌液、泪、乳汁、胆汁、血液(白细胞)、子宫颈管的粘膜、内外生殖器的粘膜、羊水、或尿。
4.权利要求3的生物样本的预处理方法,其特征在于:所述动物为人类。
5.权利要求1至4中任一项的生物样本的预处理方法,其特征在于:所述生物样本包括人类鼻粘膜。
6.权利要求1至5中任一项的生物样本的预处理方法,其特征在于:进一步对所述生物样本实施溶菌酶C(Lysozyme C)的反转录抑制活性抑制处理。
7.权利要求6的生物样本的预处理方法,其特征在于:通过在所述生物样本中添加溶菌酶C(Lysozyme C)的反转录抑制活性抑制剂,来对所述生物样本实施溶菌酶C(Lysozyme C)的反转录抑制活性抑制处理。
8.权利要求7的生物样本的预处理方法,其特征在于:所述RNA分解活性抑制剂及所述反转录抑制活性抑制剂中的至少一种包括铁离子剂及碳酸根离子剂。
9.权利要求8的生物样本的预处理方法,其特征在于:对添加了所述铁离子剂及碳酸根离子剂的所述生物样本进行加热处理。
10.权利要求1至9中任一项的生物样本的预处理方法,其特征在于:进一步在所述生物样本中添加极性表面活性剂。
11.权利要求10的生物样本的预处理方法,其特征在于:所述极性表面活性剂为SDS。
12.检测方法,其是生物样本中的RNA的检测方法,其特征在于:
所述生物样本包含乳铁蛋白(Lactferrin),
并且包括:对所述生物样本进行预处理的预处理步骤,及
通过对经所述预处理的生物样本中的所述RNA进行扩增而进行检测的RNA扩增检测步骤,
所述预处理步骤通过权利要求1至11中任一项的生物样本的预处理方法实施。
13.权利要求12的检测方法,其特征在于:所述预处理步骤通过权利要求1至9中任一项的生物样本的预处理方法实施,
在所述RNA扩增检测步骤中,在经所述预处理的生物样本中进一步添加表面活性剂。
14.权利要求13的检测方法,其特征在于:所述表面活性剂为非极性表面活性剂。
15.权利要求12至14中任一项的检测方法,其特征在于:所述RNA的扩增通过使用反转录酶的基因扩增方法而实施。
16.权利要求15的检测方法,其特征在于:所述基因扩增方法是使用链置换DNA聚合酶的等温扩增方法。
17.预处理试剂盒,其是包含RNA的生物样本的预处理试剂盒,其特征在于:
所述生物样本包含乳铁蛋白(Lactferrin),
并且所述预处理试剂盒包含乳铁蛋白的RNA分解活性抑制剂。
18.权利要求17的预处理试剂盒,其特征在于:进一步包含溶菌酶C(Lysozyme C)的反转录抑制活性抑制剂。
19.权利要求18的预处理试剂盒,其特征在于:所述RNA分解活性抑制剂及所述反转录抑制活性抑制剂中的至少一种包含铁离子剂及碳酸根离子剂。
20.权利要求19的预处理试剂盒,其特征在于:以相互不接触的状态包含所述铁离子剂及所述碳酸根离子剂。
21.权利要求17至20中任一项的预处理试剂盒,其特征在于:进一步包含极性表面活性剂。
22.权利要求21的预处理试剂盒,其特征在于:所述极性表面活性剂为SDS。
23.权利要求17至20中任一项的预处理试剂盒,其特征在于:进一步包含非极性表面活性剂。
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