[发明专利]含有与聚阴离子多肽偶联的、衍生自CD4受体的肽的用于治疗艾滋病的新共轭分子

说明书

技术领域

本发明涉及含有衍生自CD4受体的肽和有机分子的共轭分子，有机分子例如聚阴离子多肽。该共轭分子可以用于抗病毒治疗，也就是用于艾滋病的治疗。本发明进一步涉及制备所述共轭分子的方法。

背景技术

在大量血清反应阳性的HIV患者中，结合核苷（NRTI）、非–核苷（NNRTI）和/或蛋白酶抑制剂（PI）的三联疗法导致病毒载量（viral charge）降低至检测水平以下。这些治疗同时靶向逆转录和蛋白质水解。这种功效已经导致由HIV感染导致的死亡数目的本质的减少。但不幸地，约80%的患者显示了抗病毒抗性的基因型，更忧虑地，45.5%的病毒群对NRTI/PI联合治疗具有抗性，而26%对三种抗–HIV类的联合治疗具有抗性（Tamalet等人,AIDS.2003Nov7;17(16):2383–8）。这种观察特别令人不安，是因为在70%接受治疗的患者中发现长期三联疗法治疗的副作用（皮下脂肪萎缩、脂肪营养不良、高三酸甘油酯血症、高胆固醇血症、神经病等）导致顺应性差以及通常导致抗性的治疗“突然”停止。因此，优先考虑开发具有较少副作用和没有交叉抗性的较低严重形式的治疗，尽管市场上目前可以得到大量的药物。鉴于此，有必要以HIV复制步骤为靶向，而非逆转录和蛋白质水解。

在病毒性感染循环中，病毒进入细胞是重要步骤。该过程被分成两个阶段：第一，病毒在细胞表面与特定宿主受体相互作用，接着病毒遗传物质渗透入靶细胞。关于HIV，参与粘附和进入机制的分子伴侣已很好地确定。gp120病毒包膜糖蛋白，通过结合宿主细胞的跨膜糖蛋白CD4，本质上决定病毒/细胞相互作用的复合物。这种相互作用导致gp120中构象的改变，gp120暴露出特定的表位，称为CD4-诱导（CD4i），因此建立趋化因子受体（基本上为CCR5和CXCR4）的结合位点。因此，CCR5和CXCR4在细胞表面充当gp120共受体。第二种相互作用导致gp120/gp41蛋白质复合物的重新组织和细胞/病毒膜融合的开始。

通过所用共受体的类型定义HIV病毒的细胞趋向性。更具体地说，所谓的X4或“T向性（T–tropic）”病毒倾向于感染在它们的表面表达CXCR4的细胞株，例如T淋巴细胞。所谓的R5或“M向性（M–tropic）”病毒使用共受体CCR5且主要感染巨噬细胞和单核细胞。R5或X4病毒的存在通常与完全不同的艾滋病发展阶段相关（对R5无症状阶段，X4病毒的出现通常与不利的疾病发展结果相联系，表明共受体CXCR4的用途是艾滋病发病机理的重要因素）。由于gp120带有对CCR5和CXCR4识别的结构决定簇，所以R5和X4病毒代表两种分开的靶标。

国际专利申请WO2008/015273中显示，衍生自CD4受体的特定活化的肽可以和有机分子选择性反应，提供化学定义地共价共轭物。这种活化需要在衍生自CD4受体的肽序列中的特定位置上插入一个且只有一个氨基酸残基赖氨酸。这种插入允许在miniCD4合成和纯化之后，通过接头将有机化合物和化学物（chemistries）偶联。

WO2009/098147中公开了多种潜在抗病毒衍生物，抗病毒衍生物由包含CD4肽的共轭分子组成，其中CD4肽通过接头特异性地偶联至聚阴离子硫酸类肝素（HS）。这些共轭物表现出强大的抗病毒活性。通过gp120中存在至少两种不同的HS识别位点激发HS的作用，即V3可变环和CD4（CD4i）诱导的位点：mCD4-HS的CD4部分（moiety）被认为是通过直接相互作用触发gp120的构象变化，因此导致CD4i表位的暴露，然后共价结合的HS可以与CD4i表位相互作用，从而削弱X4和R5细胞系的HIV病毒感染。

由抑制病毒附着至细胞组成的这种方法是治疗有利的，因为它直接靶向病毒而非细胞本身。因此，其没有用结合至共受体的疗法所观察到的细胞作用。另外，考虑到保留作为各种病毒向性功能而参与其中的位点，根据本发明的化合物应当与不同的病毒分离株的gp120相互作用。尽管可能误导认为绝不会产生抗性，无论如何可以预期和其它治疗相比它将以低得多的比例发生。事实上，gp120的CD4位点需保持完整以便继续结合CD4，如参与和聚阴离子多糖的结合以便与共受体相互作用的碱性残基。这两个位点中任何一个突变的确都将导致病毒传染性降低。