[发明专利]回收植物来源的蛋白质的方法

权利要求书

1.回收植物来源的蛋白质或植物来源的超结构蛋白的方法,其包括：

a.获取植物或植物物质,其包含定位于质外体的植物来源的蛋白质或定位于质外体的植物来源的超结构蛋白；

b.处理所述植物或植物物质以松动细胞壁,从而产生具有松动细胞壁的植物或植物物质,由此使得释放包含所述植物来源的蛋白质或所述植物来源的超结构蛋白的质外体级分；以及

c.回收所述包含所述植物来源的蛋白质或所述植物来源的超结构蛋白的质外体级分。

2.根据权利要求1所述的方法,其中在所述处理步骤(步骤b)中包括化学处理、酶处理、生物处理、物理处理或其组合。

3.根据权利要求2所述的方法,其中所述物理处理包括超声。

4.根据权利要求2所述的方法,其中所述化学处理包括用一种或多于一种螯合剂、质子供体、羟基自由基、氢氧化钾、吲哚-3-乙酸、咪唑或其组合进行处理。

5.根据权利要求2所述的方法,其中所述酶处理包括酶渗入。

6.根据权利要求5所述的方法,其中所述酶渗入包括用一种或多于一种果胶酶、一种或多于一种纤维素酶、或者一种或多于一种果胶酶和一种或多于一种纤维素酶进行渗入。

7.根据权利要求4所述的方法,其中所述螯合剂是乙二胺四乙酸(EDTA)或乙二醇四乙酸(EGTA)。

8.根据权利要求2所述的方法,其中所述生物处理包括用一种或更多种扩展蛋白、生长素或其组合进行处理。

9.根据权利要求2所述的方法,其中所述酶处理包括用一种或多于一种果胶酶、一种或多于一种纤维素酶、或者一种或多于一种果胶酶和一种或多于一种纤维素酶进行处理。

10.根据权利要求9所述的方法,其中所述酶组合物不包括脂肪酶、蛋白酶或果胶酶中的一种或更多种。

11.根据权利要求1所述的方法,其中在所述获取步骤(步骤a)中,用编码所述蛋白质或超结构蛋白的核酸序列转化所述植物,所述蛋白质或超结构蛋白选自以下的组：肽、蛋白质、蛋白花环、蛋白复合物、蛋白酶体、代谢区室、转录复合物、重组复合物、光合复合物、膜转运复合物、核孔复合物、蛋白纳米颗粒、糖蛋白、抗体、多克隆抗体、单克隆抗体、单链单克隆抗体、病毒样颗粒、病毒包膜蛋白、病毒结构蛋白、病毒衣壳蛋白和病毒外壳蛋白、嵌合蛋白、嵌合蛋白复合物、嵌合蛋白纳米颗粒、嵌合糖蛋白、嵌合抗体、嵌合单克隆抗体、嵌合单链单克隆抗体、嵌合血凝素、病毒包膜蛋白、病毒结构蛋白、病毒衣壳蛋白和病毒外壳蛋白,以及收获所述植物或植物物质。

12.根据权利要求11所述的方法,其中所述核酸以瞬时方式引入所述植物中。

13.根据权利要求11所述的方法,其中所述核酸稳定整合进所述植物的基因组。

14.根据权利要求1所述的方法,其中在所述获取步骤(步骤a)中,培养所述植物并收获所述植物或植物物质。

15.根据权利要求11所述的方法,其中所述核酸编码单克隆抗体或流感血凝素。

16.根据权利要求1所述的方法,其中所述植物来源的蛋白质或超结构蛋白不包括神经氨酸酶或M蛋白。

17.根据权利要求1所述的方法,其中所述植物物质选自叶和培养植物细胞的组。

18.根据权利要求1所述的方法,其还包括步骤d)从所述质外体内容物级分中纯化所述植物来源的蛋白质或超结构蛋白。

19.根据权利要求18所述的方法,其中所述纯化步骤d)包括利用深层过滤来过滤所述质外体内容物级分以产生澄清的提取物,然后用体积排阻层析、阳离子交换树脂或亲和层析或者其组合来进行所述澄清提取物的层析。

20.根据权利要求1所述的方法,其还包括步骤d)将所述质外体内容物级分中的蛋白质或超结构蛋白与细胞碎片和不溶物质分离。

21.根据权利要求20所述的方法,其中所述分离步骤d)通过离心、深层过滤或其组合进行。