[发明专利]在早期青光眼中恢复正常视觉功能的基于PACAP（垂体腺苷酸环化酶活化多肽）的眼用制剂

说明书

技术领域

本发明涉及滴眼液形式的眼用制剂，其包含在中枢神经系统的许多区域（包括视网膜）中表达的多肽，即PACAP（垂体腺苷酸环化酶活化多肽）。

该制剂用于在视网膜营养不良/视网膜病变和视神经病变，如青光眼（先天性青光眼、婴儿青光眼、青少年青光眼、成人青光眼、慢性原发性开角型青光眼、慢性原发性闭角型青光眼和继发性青光眼，包括色素性青光眼、医源性青光眼和急性青光眼）中恢复正常视觉功能。具体而言，本发明设计用于在青光眼病的早期阶段，在导致视网膜神经节细胞丢失的系列事件仍然可逆时恢复正常视觉功能。

现有技术

鉴于其生物学作用，PACAP（隶属于VIP（血管活性肠肽）/胰高血糖素/促胰液素家族的肽）被认为是最有趣的肽之一。因此，在脊椎动物范围内保守的结构和因此保守的功能特性暗示PACAP涉及多种重要功能；实际上，实验发现已证明它涉及多种器官的发育，内分泌系统、心血管系统、呼吸系统、生殖系统和神经系统的功能，及免疫反应和昼夜节律。它在CNS的不同区域（包括视网膜）中合成，具有多效性作用，作为神经递质、神经调质或神经营养因子发挥作用。PACAP以两种形式表达：较长的38个氨基酸的肽（PACAP38）和较短的27个氨基酸的肽（PACAP27），较长的形式是主要在神经系统中表达的形式。两种基本类型的受体能够结合PACAP27和38二者：1类受体（PAC1，具有高亲和力）和2类受体（对PACAP和VIP具有等同的亲和力；可以区分两种类型的2类受体：VPAC1和2）。与PAC1结合后，PACAP诱导腺苷酸环化酶和磷脂酶C的活化，导致环AMP（cAMP）水平的提高。PACAP还可以视为g蛋白偶联受体（GPCR）的配体，g蛋白偶联受体是能够在缺乏它们的特异性配体（分别为NGF和BDNF）的情况下活化酪氨酸激酶A和B（分别为TrkA和TrkB），导致多个胞内靶标的磷酸化的受体家族（Lee和Chao,2002；Rajagopal等,2004）。

能够合成和释放PACAP的视网膜细胞的分布似乎限于神经节细胞、无长突细胞和水平细胞的亚组（Seki等2000；Hannibal和Fahrenkrug2004）；除神经节细胞外，特异性PAC1受体的分布包括一些类型的无长突细胞和Müller细胞（Seki等1997;2000;D’Agata和Cavallaro1998;Kubrusly等2005）。

因此，已提出PACAP应视为能够结合存在于视网膜中的两种类型的受体（PAC1和PAC2）的物质，这两种类型的受体对表达它们的视网膜细胞（尤其是神经节细胞）以及无长突细胞和Müller细胞发挥神经保护作用；在这种具体情况下，“神经保护作用”指具有药理学活性的分子对抗许多视网膜病变的细胞死亡特征的能力。例如，已证明PACAP（PACAP38和27）能够作为神经保护剂发挥作用，在诸如缺血性视网膜病变的多种血管障碍中预防对视网膜细胞的损伤，并预防视神经损伤后神经节细胞的死亡；PACAP还预防兴奋性神经毒素（如谷氨酸和红藻氨酸）处理导致的视网膜细胞死亡，及紫外线照射引起的细胞死亡（Silveira等,2002；Seki等2006；Atlasz等2007；Atlasz等,2010）。

这些研究证明，PACAP已用于神经保护领域，更具体而言，用于在多种动物视网膜病变模型中预防视网膜细胞的死亡。此外，从未描述过PACAP对受影响的视网膜的直接作用来恢复其正常功能性，尤其是在细胞死亡之前的早期神经变性阶段期间。

已知在患有青光眼的患者中及在实验性青光眼模型中，神经节细胞的变性/死亡及随后其视网膜密度的降低代表青光眼的晚期（Quigley等1989；Buckingham等2008；Boland和Quigley2011）。但是，在青光眼的早期，神经节细胞尚未损伤至接近死亡，但开始异常发挥功能，导致视力降低；可以通过在神经节细胞的水平记录结构化视觉刺激（其来源在内核层中）产生的视网膜电图（图像ERG、P-ERG）来检测这些功能改变（Maffei和Fiorentini,1982；Maffei和Fiorentini,1985）。已证明P-ERG对在实验动物模型和患有高压眼或青光眼的患者中检测内核层的早期损伤都有用（Domenici等,1991；Ventura和Porciatti2006；Parisi等,2006；Falsini等,2008）。