[发明专利]用于识别个体对免疫球蛋白疗法的响应性的实验和方法

说明书

本发明涉及用于确定个体对免疫球蛋白疗法的响应性的方法。

当B细胞表面上的抗体(B细胞受体)结合至特异性外源抗原时，B细胞即识别病原体。作为响应，B细胞分裂并分化成浆细胞，而浆细胞分泌出成千上万的识别激活抗原的抗体拷贝。抗体(也称免疫球蛋白)识别各种靶标，包括许多不同的化合物、结构体以及作为细胞结构体的一部分的那些物质，并且中和它们的生物学效果。免疫复合物被快速清除，导致“靶标”分子被去除，因此，识别、结合和去除功能无疑是具有必可或缺的重要性，缺乏免疫球蛋白水平或免疫球蛋白水平减少的患者易于患严重且反复的感染，这显得免疫球蛋白的功能更加重要。除了针对侵入物的这种保护功能之外，免疫球蛋白在平衡和调节免疫系统方面承担着重要的调节功能。免疫球蛋白产物通常来源于混合的血液或血浆捐献，并且根据专业人员孰知的方法制备，它们用于治疗IMID(免疫介导炎性疾病)以及所谓的AID(自身免疫疾病)，而这些定义可能表达出一种疾病的相同或重叠特征。免疫球蛋白G(IgG)浓缩物通经常静脉内(IVIG)或皮下(SCIG)施用，但也可经肌肉内、吸入、眼内、口服或局部施用。当B细胞攻击性地与自身反应时，则病理学潜能达到极限。因此，在患有自身免疫疾病或免疫介导炎性疾病(IMID)的患者中，B细胞清除被视为一种吸引人的疗法不令人惊讶。

自然杀伤(NK)细胞是大颗粒淋巴细胞，属于先天免疫系统，因为不同于适应性或抗原特异性免疫系统中的T淋巴细胞或B淋巴细胞，NK细胞不会对T细胞受体或免疫球蛋白基因的种系构造进行重排。NK细胞是淋巴细胞谱系，具有细胞毒性功能和生成细胞因子的效应分子功能。NK细胞基于对NK细胞谱系相对特异性的激活受体和抑制性受体完成对细胞的选择性裂解。激活受体，例如NKG2D，识别表达在转化的或受感染的细胞上的天然应力信号配体(natural stress signal ligand)或病原体来源的配体。相反，CD94-NKG2A复合体的抑制性受体，KIR家族(杀伤细胞免疫球蛋白样受体)，自体结合而不结合至同种异体MHC I(主要组织相容性复合物I)。KIR受体是高度多态性的，在NK细胞中不均匀地表达，并且在NK细胞自身耐受性方面具有重要作用。在许可(licensing)过程中，NK细胞在进行了生长期间抑制性受体和自身MHC之间的生产性相互作用之后获得了功能。被许可的NK细胞表达几种可能的抑制性受体等位基因中的至少一个。因此，NK细胞中的MHC识别是多样化的，因而至少一种NK细胞亚群将响应任何单个MHC I类分子的下调。当激活NK细胞效应分子功能就绪时，会分泌IFN-γ，并且增强粒酶和穿孔素释放。NK细胞还表达Fcγ受体，其识别几个IgG子类，以介导抗体依赖性细胞毒性。这些受体以及它们在NK细胞监测和细胞溶解中的作用已被充分研究，并且与NK细胞的身份紧密相连。在流式细胞仪上，所谓的CD56^明和CD56^暗可被区分出来哪个表达或不表达Fcγ RIII (CD16)。本领域技术人员孰知基于“设门(gating)”的流式细胞仪结果的解释。

因此，可识别出4中主要的亚群，它们是：

CD16+ / CD56^明

CD16+ / CD56^暗

CD16- / CD56^明

CD16- / CD56^暗。

NK细胞是宿主防御的重要部分。但是，如果被异常调节，例如由于疾病导致或在疾病过程中被异常调节，它们可引导自身攻击“自身结构体”，导致严重的病理学结果，像攻击器官结构体和外周系统和脑中的寡树突胶质细胞。虽然导致这种自身攻击的机制尚未完全明白，但需要重新获得对这些细胞的控制并将它们的杀伤功能降低至生理上合理的水平。因为杀伤效率与效应分子的脱颗粒和释放紧密相关，因此一个目的就是控制这种脱颗粒作用以降低损害。