[发明专利]分析受试者的血液样品存在疾病标记物的方法

权利要求书

1.一种分析受试者的血液样品中的疾病标记物的存在的方法，所述方法包括以下步骤：

a）从所述血液样品中的去核血细胞、优选凝血细胞中提取核酸以提供去核血细胞提取的核酸部分；以及

b）分析所述去核血细胞提取的核酸部分中的疾病标记物的存在，

其中，所述疾病标记物是所述受试者的成核细胞的基因中的疾病特异性的突变；或者

其中所述疾病标记物是所述受试者的成核细胞的基因的疾病特异性的表达谱。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述去核血细胞是凝血细胞或红细胞，优选是凝血细胞。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述疾病选自由自身免疫性疾病、皮肤病、眼病、内分泌疾病、神经性障碍和心血管疾病所组成的组中。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述疾病不是选自包括癌症、心血管疾病、系统性红斑狼疮、镰刀状细胞疾病、阿尔茨海默氏疾病，与病态血小板功能相关的疾病，和/或与病态巨核细胞功能相关疾病的组中的疾病。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述去核血细胞提取的核酸部分是疾病来源的核酸。

6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述去核血细胞提取的核酸部分包括源自成核细胞的核酸。

7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述成核细胞不是巨核细胞。

8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述去核血细胞提取的核酸部分不是巨核细胞来源的核酸或巨核细胞来源的RNA。

9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述疾病特异性的突变位于染色体基因中，或其中所述疾病特异性的表达谱是染色体基因的疾病特异性的表达谱。

10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述核酸是核糖核酸（RNA），优选是mRNA。

11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，分析所述去核血细胞提取的核酸部分中的疾病标记物的存在的所述步骤b）包括：

i）使用至少一个核酸突变特异性的扩增引物或探针，通过反转录酶的聚合酶链式反应扩增来选择性扩增所述突变；或者

ii）通过反转录酶的聚合酶链式反应扩增来选择性扩增多个mRNA，以确定编码所述mRNA的染色体基因的表达水平，从而提供所述基因的表达谱且将所述表达谱与参照谱进行对比。

12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述方法是诊断受试者中所述疾病的方法的一部分，且其中，所述疾病标记物在所述去核血细胞提取的核酸部分中的存在是所述受试者患有所述疾病的指示。

13.一种用于确定受试者中疾病阶段或疾病治疗的功效的方法，包括以下步骤：

在第一时间点，使用根据权利要求1～12中任一项所述的方法，分析受试者的血液样品中的疾病标记物的存在，从而提供作为所述受试者中的所述疾病标记物的水平的第一值；

在第二时间点，使用根据权利要求1～12中任一项所述的方法，分析所述受试者的血液样品中的疾病标记物的存在，从而提供作为所述受试者中的所述疾病标记物的水平的第二值，其中所述受试者已经在所述第一时间点和所述第二时间点之间经过疾病治疗；以及

对比所述第一值和所述第二值，以确定所述疾病治疗在所述受试者中的功效。

14.一种用于确定受试者中的疾病阶段的方法，包括以下步骤：

使用根据权利要求1～12中任一项所述的方法，分析受试者的血液样品中的疾病标记物的存在，从而提供作为所述受试者中的所述疾病标记物的水平的测试值；

提供用于所述疾病标记物的水平的参照值，其中，所述参照值与疾病的特定阶段相关；以及

对比所述测试值和所述参照值，以确定所述疾病在所述受试者中的阶段。