[发明专利]改良型腈水合酶有效

专利信息
申请号: 201280028405.5 申请日: 2012-05-30
公开(公告)号: CN103649312B 公开(公告)日: 2017-03-22
发明(设计)人: 渡边文昭;安保贵永;原爱 申请(专利权)人: 三菱丽阳株式会社
主分类号: C12N15/09 分类号: C12N15/09;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N9/88;C12P13/02
代理公司: 北京林达刘知识产权代理事务所(普通合伙)11277 代理人: 刘新宇,李茂家
地址: 日本*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: 改良 水合
【权利要求书】:

1.一种蛋白质,

其为以下(A)或(B)的蛋白质;

(A)蛋白质,其特征在于,包含在野生型腈水合酶的氨基酸序列中下述(a)、(b)、(c)、(d)和(e)的氨基酸残基被置换为其他的氨基酸残基、进而选自由下述(f)~(q)所组成的组的至少一个氨基酸残基被置换为其他的氨基酸残基而成的氨基酸序列,并且具有腈水合酶活性;

(a)β亚基的氨基酸序列中,由N末端的氨基酸残基开始数167残基下游的氨基酸残基、

(b)β亚基的氨基酸序列中,由N末端的氨基酸残基开始数219残基下游的氨基酸残基、

(c)β亚基的氨基酸序列中,由N末端的氨基酸残基开始数57残基下游的氨基酸残基、

(d)β亚基的氨基酸序列中,由N末端的氨基酸残基开始数114残基下游的氨基酸残基、

(e)β亚基的氨基酸序列中,由N末端的氨基酸残基开始数107残基下游的氨基酸残基、

(f)β亚基的氨基酸序列中,由N末端的氨基酸残基开始数218残基下游的氨基酸残基、

(g)β亚基的氨基酸序列中,由N末端的氨基酸残基开始数190残基下游的氨基酸残基、

(h)β亚基的氨基酸序列中,由N末端的氨基酸残基开始数168残基下游的氨基酸残基、

(i)β亚基的氨基酸序列中,由N末端的氨基酸残基开始数144残基下游的氨基酸残基、

(j)β亚基的氨基酸序列中,由N末端的氨基酸残基开始数133残基下游的氨基酸残基、

(k)β亚基的氨基酸序列中,由N末端的氨基酸残基开始数112残基下游的氨基酸残基、

(l)β亚基的氨基酸序列中,由N末端的氨基酸残基开始数105残基下游的氨基酸残基、

(m)β亚基的氨基酸序列中,由N末端的氨基酸残基开始数95残基下游的氨基酸残基、

(n)β亚基的氨基酸序列中,由N末端的氨基酸残基开始数17残基下游的氨基酸残基、

(o)β亚基的氨基酸序列中,由N末端的氨基酸残基开始数15残基下游的氨基酸残基、

(p)α亚基的氨基酸序列中,由构成辅基结合区域的氨基酸序列C(S/T)LCSC的最下游侧的C残基起67残基下游的氨基酸残基、

(q)α亚基的氨基酸序列中,由构成辅基结合区域的氨基酸序列C(S/T)LCSC的最下游侧的C残基起17残基下游的氨基酸残基、

(B)蛋白质,其特征在于,包含在(A)蛋白质的氨基酸序列中除了所述置换后的氨基酸残基之外缺失、置换和/或附加有1个或数个氨基酸残基而成的氨基酸序列,并且具有腈水合酶活性。

2.一种DNA,其编码权利要求1所述的蛋白质。

3.一种DNA,其与权利要求2所述的DNA在严格条件下杂交并且编码具有腈水合酶活性的蛋白质。

4.一种重组载体,其包含权利要求2或3所述的基因DNA。

5.一种转化体,其包含权利要求4所述的重组载体。

6.一种腈水合酶,是从培养权利要求5所述的转化体而得到的培养物中提取的。

7.一种腈水合酶的制造方法,其特征在于,培养权利要求5所述的转化体,从得到的培养物中提取腈水合酶。

8.一种酰胺化合物的制造方法,其特征在于,使权利要求1所述的蛋白质或培养权利要求5所述的转化体而得到的培养物或该培养物的处理物与腈化合物接触。

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