[发明专利]具有来自IFNα2的SAR元件的表达系统有效
申请号: | 201280029190.9 | 申请日: | 2012-03-20 |
公开(公告)号: | CN103620034A | 公开(公告)日: | 2014-03-05 |
发明(设计)人: | Y·杜罗彻尔 | 申请(专利权)人: | 加拿大国家研究委员会 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/00;C12N15/21;C12N15/67;C12N15/85;C07K14/56 |
代理公司: | 北京北翔知识产权代理有限公司 11285 | 代理人: | 孙占华;张广育 |
地址: | 加拿大*** | 国省代码: | 加拿大;CA |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 具有 来自 ifn sar 元件 表达 系统 | ||
1.一种分离的多核苷酸,其包含不多于755个核苷酸并且包含来自SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的至少500个连续的核苷酸。
2.权利要求1的分离的多核苷酸,其包含来自SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的至少600个连续的核苷酸。
3.权利要求1的分离的多核苷酸,其包含来自SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的至少700个连续的核苷酸。
4.权利要求1的分离的多核苷酸,其包含来自SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的至少750个连续的核苷酸。
5.一种用于在宿主细胞中产生重组蛋白的表达系统,其包含:编码目的蛋白的基因;用于操纵所述表达系统的核苷酸序列;和,以顺式的方式纳入所述表达系统中用于增强所述基因表达的表达增强子,所述表达增强子包含权利要求1-4任一项定义的多核苷酸。
6.权利要求5的表达系统,其包含含有所述基因和所述表达增强子的质粒载体。
7.权利要求5的表达系统,其包含含有所述基因和所述表达增强子的附加型载体。
8.权利要求5-7任一项的表达系统,其中所述基因编码单克隆抗体、红细胞生成素、干扰素、血管内皮生长因子、干细胞生长因子、生长激素或胰岛素样生长因子结合蛋白。
9.权利要求5-8任一项的表达系统,其中用于操纵所述表达系统的核苷酸序列包含以下中的的一种或多种:启动子、复制起点、前导序列、剪接供体、内含子、剪接受体、选择标记、克隆位点、限制性内切酶共有位点(consensus site)和多腺苷酸化信号。
10.一种宿主细胞,其包含权利要求5-9任一项定义的表达系统。
11.权利要求10的宿主细胞,其为哺乳动物细胞。
12.权利要求11的宿主细胞,其中所述哺乳动物细胞包括人胚肾293(HEK293)细胞、中国仓鼠卵巢(CHO)细胞、幼仓鼠肾(BHK21)细胞、PerC6细胞或COS7细胞。
13.权利要求11的宿主细胞,其中所述哺乳动物细胞包括人胚肾293(HEK293)细胞或中国仓鼠卵巢(CHO)细胞。
14.一种产生重组蛋白的方法,其包括:用权利要求5-9任一项定义的表达系统转染宿主细胞;在适于表达所述基因的条件下培养所述宿主细胞以产生所述目的蛋白;和,回收所述目的蛋白。
15.权利要求14的方法,其中所述宿主细胞包含哺乳动物细胞。
16.权利要求14的方法,其中所述宿主细胞包括人胚肾293(HEK293)细胞、中国仓鼠卵巢(CHO)细胞、幼仓鼠肾(BHK21)细胞、PerC6细胞或COS7细胞。
17.权利要求14的方法,其中所述宿主细胞包括人胚肾293(HEK293)细胞或中国仓鼠卵巢(CHO)细胞。
18.权利要求1-4任一项定义的多核苷酸以顺式方式在用于产生重组蛋白的表达系统中作为表达增强子的用途。
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