[发明专利]酶功能改变方法及其突变体

权利要求书

1.一种蛋白质，属于中链脱氢酶/还原酶家族，并具有选自下述的（a）～（d）中的至少一种氨基酸残基：

（a）与序列号1的Asp-201在立体结构上同等位置的氨基酸残基是Ala或Ser，

（b）与序列号1的Lys-202在立体结构上同等位置的氨基酸残基是Arg，

（c）与序列号1的Lys-203在立体结构上同等位置的氨基酸残基是Ser，以及，

（d）与序列号1的Ala-206在立体结构上同等位置的氨基酸残基是Lys。

2.根据权利要求1所述的蛋白质，其由与序列号1所示的氨基酸序列具有85%以上的序列同源性的氨基酸序列构成。

3.根据权利要求1或2所述的蛋白质，其中，由在序列号1所示的氨基酸序列中导入有选自下述的（e）～（h）中的至少一种突变的氨基酸序列构成：

（e）将Asp-201置换为Ala或Ser，

（f）将Lys-202置换为Arg，

（g）将Lys-203置换为Ser，以及，

（h）将Ala-206置换为Lys。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的蛋白质，其由序列号2～8中任一项所述的氨基酸序列构成。

5.由编码权利要求1～4中任一项所述的蛋白质的碱基序列构成的DNA。

6.一种DNA，选自以下（A）、（B）以及（C）：

（A）由序列号25～31中的任一个所述的碱基序列构成的DNA，

（B）与包含与序列号25～31中的任一个所述的碱基序列互补的碱基序列的DNA在严格条件下杂交、且由编码具有氧化还原酶活性的蛋白质的碱基序列构成的DNA，

（C）与序列号25～31中的任一个所述的碱基序列具有85%以上的序列同源性、且由编码具有氧化还原酶活性的蛋白质的碱基序列构成的DNA。

7.一种载体，包含权利要求5或6所述的DNA。

8.一种转化体，是用权利要求7所述的载体转化宿主细胞而得到的。

9.权利要求8所述的转化体的培养物。

10.一种氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸的制造方法，包括如下工序：用权利要求1～4中任一项所述的蛋白质，使还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸进行变换，得到氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸。

11.一种还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸的制造方法，包括如下工序：用权利要求1或2所述的蛋白质，使氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸进行变换，得到还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸。

12.一种还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸的制造方法，通过使还原酶作用于由权利要求10所述的方法得到的氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸来进行。

13.一种氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸的制造方法，通过使氧化酶作用于由权利要求11所述的方法得到的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸来进行。

14.根据权利要求10～13中任一项所述的制造方法，其特征在于，利用权利要求8所述的转化体或权利要求9所述的培养物。

15.通过权利要求10～14中任一项所述的制造方法制造的化合物。